Qiagen، 762331، PAXgene 96 Blood RNA Kit (4)

٤ صفائح PAXgene 96 RNA، ٤ صفائح ترشيح PAXgene 96، محاليل منظمة، بروتينيز K، مجموعات DNase خالية من RNase، صفائح شريط AirPore، أوعية تجميع. تُستخدم مع أنابيب PAXgene Blood RNA.

سمات

- تنقية متوازية للحمض النووي الريبي من 96 عينة
- معالجة العينات بشكل موحد قبل التحليل
- لا استخلاص أو ترسيب عضوي
- عزل الحمض النووي الريبي داخل الخلايا عالي الجودة
- معالجة متكاملة باستخدام إنزيم ديوكسي ريبونيوكلياز لإزالة الحمض النووي الجينومي

تفاصيل المنتج

تُستخدم مجموعة PAXgene 96 Blood RNA Kit لتنقية الحمض النووي الريبوزي الخلوي (RNA) بكفاءة عالية يدويًا. عند استخدامها مع أنابيب PAXgene Blood RNA Tubes (متوفرة من BD، رقم المنتج 762165) لجمع العينات وتثبيتها، يوفر النظام حلاً تحليليًا متكاملاً لما قبل التحليل، بدءًا من جمع العينات وتثبيتها وصولاً إلى تنقيتها للحصول على حمض نووي ريبوزي عالي الجودة، لدعم المشاريع ذات الإنتاجية العالية، مثل الدراسات البحثية السريرية.

أداء

تتيح مجموعة PAXgene 96 لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم (Blood RNA Kit) عزل الحمض النووي الريبوزي الكلي من الدم البشري الكامل بكفاءة عالية. وبالاقتران مع أنابيب PAXgene لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم (متوفرة من BD، رقم المنتج 762165)، توفر المجموعة حلاً تحليلياً متكاملاً لجمع الحمض النووي الريبوزي من الدم وتثبيته وصولاً إلى تنقيته للحصول على حمض نووي ريبوزي عالي الجودة. يتميز إجراء PAXgene 96 لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم بدقته العالية وقابليته للتكرار، حيث ينتج عادةً ما بين 4 و20 ميكروغرام من الحمض النووي الريبوزي من 2.5 مل من الدم البشري الكامل مع أدنى حد من خطر التلوث المتبادل بين العينات. تحتوي أنابيب PAXgene لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم على مزيج خاص من الكواشف التي تعمل على تثبيت الحمض النووي الريبوزي فوراً. يمنع هذا المزيج التغيرات الجذرية في أنماط التعبير الجيني للحمض النووي الريبوزي الخلوي التي تحدث عادةً في المختبر بعد جمع الدم (انظر الأشكال "استخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم باستخدام الطرق القياسية"، و"تثبيت التعبير الجيني"، و"الكشف عن التيروزيناز بعد تخزين الدم"). إن الإجراء عالي الإنتاجية بسيط وسريع وفعال، كما أن معالجة 96 عينة بالتوازي توفر وقتًا كبيرًا في دراساتك البحثية السريرية.

مبدأ

في نظام PAXgene 96 لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم، تُجمع عينات الدم مباشرةً في أنابيب PAXgene لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم، ويُستخلص الحمض النووي الريبوزي باستخدام مجموعة PAXgene 96 لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم. تحتوي أنابيب PAXgene لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم على مزيج خاص من الكواشف التي تُحقق استقرارًا فوريًا للحمض النووي الريبوزي. يمكن تخزين عينات الدم في أنابيب PAXgene لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم لمدة تصل إلى 5 أيام في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك، يُستخلص الحمض النووي الريبوزي باستخدام تقنية غشاء السيليكا المتوفرة في مجموعة PAXgene 96 لاستخلاص الحمض النووي الريبوزي من الدم. يُمثل الحمض النووي الريبوزي الناتج بدقة نمط التعبير الجيني في الجسم الحي، وهو مناسب للاستخدام في مجموعة واسعة من التطبيقات اللاحقة.

إجراء

تُجمع عينات الدم (2.5 مل) في أنابيب PAXgene Blood RNA (متوفرة من BD، رقم المنتج 762165)، ويمكن تخزينها أو نقلها في درجة حرارة الغرفة إذا لزم الأمر. في إجراء PAXgene 96 Blood RNA، تبدأ عملية عزل الحمض النووي الريبوزي (RNA) بخطوة طرد مركزي لترسيب الأحماض النووية في أنبوب PAXgene Blood RNA. يُغسل الراسب، ويُضاف إليه بروتينيز K لهضم البروتينات. يُضاف الكحول لضبط ظروف الارتباط. تُوضع المستخلصات على صفيحة ترشيح PAXgene 96 وتُطرد مركزيًا لإزالة بقايا الخلايا. ثم تُوضع المستخلصات على صفيحة PAXgene 96 RNA (انظر مخطط سير العمل "إجراء PAXgene 96 Blood RNA"). يُزال الحمض النووي المتبقي (DNA) من خلال هضمه بواسطة إنزيم DNase I. تُزال الملوثات المتبقية في ثلاث خطوات غسل فعالة قبل استخلاص الحمض النووي الريبوزي النقي (RNA).

التطبيقات

- تقنيات تضخيم الأحماض النووية، مثل RT-PCR وNASBA
- تحليل المصفوفات التعبيرية والرقائق التعبيرية
- تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي العكسي (RT-PCR)، بما في ذلك تقنية TaqMan
- تخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA)
- الحماية من إنزيمات RNase و S1 نوكلياز
- تحليل نورثرن، وتحليل البقعة النقطية، وتحليل البقعة الشقّية
- تمديد البرايمر

إن الحمض النووي الريبي المعزول من الدم البشري الكامل جاهز للاستخدام في مجموعة واسعة من التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك: