مجموعة كياجين، 78404، آر إن إيزي باور فيكال برو

لتحضير 50 ​​عينة: 50 أنبوب PowerBead Pro، 50 عمود فصل الحمض النووي الريبوزي للميكروبيوم، 100 أنبوب تجميع (2 مل)، 50 أنبوب استخلاص (1.5 مل)، ماء خالٍ من إنزيم RNase، إنزيم DNase I، الكواشف والمحاليل المنظمة.

سمات

- عزل فعال للحمض النووي الريبي الميكروبي عالي الجودة
- بروتوكول سهل الاستخدام لعزل الحمض النووي الريبي الكلي من عينات الميكروبيوم الصعبة
- عزل الحمض النووي الريبي عالي النقاء بتقنية إزالة المثبطات
- قابل للأتمتة على QIAcube Connect

تفاصيل المنتج

باستخدام مجموعة RNeasy Powerfecal Pro، يمكنك عزل الحمض النووي الريبوزي الكلي من عينات البراز والحمأة ومياه الصرف الصحي الغنية بمثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). تعتمد المجموعة على تقنية إزالة المثبطات من الجيل الثاني (IRT) من شركة QIAGEN، مما ينتج عنه كميات كبيرة من الحمض النووي الريبوزي عالي النقاء، والذي يمكن استخدامه فورًا في تطبيقات لاحقة، بما في ذلك تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR) وتفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR) وتقنيات التسلسل من الجيل التالي (مثل تسلسل الحمض النووي الريبوزي أو الميتا ترانسكريبتوم). وتُكمل تقنية الخرز المُثبتة وكيمياء التحلل بروتوكولًا سهل الاستخدام وحصريًا.

يمكن أتمتة عملية عزل الحمض النووي الريبي باستخدام مجموعة RNeasy PowerFecal Pro Kit على جهاز QIAcube Connect.

هل ترغب بتجربة هذا الحل لأول مرة؟ اطلب عرض سعر لمجموعة تجريبية.

أداء

تتيح مجموعة RNeasy PowerFecal Pro الحصول على كمية كبيرة من الحمض النووي الريبوزي (RNA) عالي النقاء من عينات الميكروبيوم المتنوعة (انظر الأشكال: كمية الحمض النووي الريبوزي - قياس QIAexpert، ونسبة نقاء الحمض النووي الريبوزي 260/280، ونسبة نقاء الحمض النووي الريبوزي 260/230). كما تتيح المجموعة إزالة مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بكفاءة عالية للحصول على حمض نووي ريبوزي نقي مع عزل مشترك منخفض للمثبطات (انظر الشكل: جودة الحمض النووي الريبوزي - تثبيط تفاعل البوليميراز المتسلسل) وجودة عالية للحمض النووي الريبوزي (انظر الأشكال: قيمة RIN، ونسبة 23S/16S).

مبدأ

تُستخلص مجموعة RNeasy PowerFecal Pro الحمض النووي الريبوزي الكلي بكفاءة عالية من مواد أولية متنوعة مثل البراز والأمعاء والحمأة ومياه الصرف الصحي. توفر هذه المجموعة حمضًا نوويًا ريبوزيًا عالي الجودة مع الحد الأدنى من تنقية الحمض النووي المصاحب. يمكن استخدام المجموعة لعزل الحمض النووي الريبوزي آليًا على جهاز QIAcube Connect.

من المهم حفظ عينات البراز بعد جمعها مباشرة للحفاظ على سلامة الحمض النووي الريبوزي (RNA). مع تقنية PowerProtect DNA/RNA لتثبيت الحمض النووي، نقدم حلاً شاملاً، بدءًا من جمع العينات وحتى استخلاص الحمض النووي الريبوزي (انظر الشكل: تثبيت العينة واستخلاص الحمض النووي الريبوزي).

إجراء

نوصي بالبدء بـ 50-100 ملغ من البراز. قم بتجنيس كل عينة في أنبوب خلط خرز سعة 2 مل يحتوي على مزيج من خرز التحلل. تسمح التصادمات الميكانيكية بين الخرز، بالإضافة إلى التفكك الكيميائي لأغشية الخلايا، بتحلل خلايا المضيف والميكروبات. ثم استخدم تقنية IRT لإزالة المواد الشائعة في عينات البراز، والتي تثبط تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) والتطبيقات اللاحقة الأخرى. بعد ذلك، مرر المستخلص عبر عمود MB RNA Spin Column. أزل الحمض النووي (DNA) باستخدام هضم DNase على العمود. ثم استخدم محلول غسيل لإزالة الإنزيم وأي أحماض نووية مهضومة (انظر الشكل الخاص بإجراء RNeasy PowerFecal Pro). استخلص الحمض النووي الريبوزي (RNA) باستخدام ماء خالٍ من RNase. أصبح الآن جاهزًا للاستخدام في أي تطبيقات لاحقة.

تخزين العينات وحفظها: يتأثر مردود وسلامة الأحماض النووية المستخلصة من الميكروبات الموجودة في البراز بشكل كبير بحالة الجهاز الهضمي، والنظام الغذائي للفرد، والمدة الزمنية بين جمع العينة وحفظها. ولتحسين جودة الأحماض النووية المستخلصة من البراز، يُنصح بمعالجة العينة بأسرع وقت ممكن بعد جمعها. يعمل كاشف PowerProtect DNA/RNA على تثبيت عينات البراز في درجة حرارة الغرفة.

يمكن أتمتة عملية تنقية الحمض النووي الريبوزي (RNA) باستخدام مجموعة RNeasy PowerFecal Pro على جهاز QIAcube Connect أو جهاز QIAcube التقليدي. صُمم جهاز QIAcube Connect لأتمتة عملية تحضير العينات ذات الإنتاجية المنخفضة، وذلك بالاعتماد على تقنية الأعمدة الدوارة. يتبع البروتوكول الآلي نفس خطوات الإجراء اليدوي (أي التحلل، والربط، والغسل، والإذابة)، حيث تتم معالجة ما يصل إلى 12 عينة في كل دورة.

صُمم جهاز QIAcube Connect لإجراء عملية تنقية آلية للأحماض النووية والبروتينات في تطبيقات البيولوجيا الجزيئية. وهو مُخصص للاستخدام من قِبل مُستخدمين مُحترفين مُدربين على تقنيات البيولوجيا الجزيئية وتشغيل جهاز QIAcube Connect.

التطبيقات

تتيح مجموعة RNeasy PowerFecal Pro Kit عزل الحمض النووي الريبي عالي الجودة الذي يمكن استخدامه على الفور في التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك RT-PCR و qPCR و digital PCR وتسلسل الجيل التالي (مثل RNA-seq أو metatranscriptome).