Qiagen، 80004، مجموعة AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit (50)

لـ 50 عينة: أعمدة AllPrep DNA الدوارة، أعمدة RNeasy الدوارة، أنابيب التجميع، كواشف ومحاليل منظمة خالية من RNase

سمات

- استخلاص أقصى قدر من كل مادة محللة من العينات الثمينة
- توفير الوقت من خلال سير عمل قصير ومبسط
- بيانات قابلة للمقارنة حيث تأتي المواد التحليلية من نفس العينة
- لا حاجة للمذيبات العضوية مثل الفينول والأسيتون

تفاصيل المنتج

تتيح مجموعة AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit تنقية الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA والبروتين في آنٍ واحد من نفس عينة الخلية أو النسيج. يمكن استخدام هذه المجموعة مع كاشف Allprotect Tissue Reagent، الذي يوفر تثبيتًا فوريًا للحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA والبروتين في عينات الأنسجة لتخزينها على المدى الطويل دون الحاجة إلى التجميد. يمكن تفتيت الأنسجة بكفاءة باستخدام نظام TissueRuptor أو TissueLyser.

مبدأ

تُوحّد مجموعة AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit عملية تحضير العينات في علم الأحياء النظمي. يتم تحضير الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA والبروتين من مصدر واحد، مما يُزيل التباين الناتج عن تحضير هذه المواد من عينات مختلفة. لا حاجة لتقسيم العينة إلى ثلاثة أجزاء قبل التنقية، مما يسمح باستخلاص أقصى قدر من الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA والبروتين. إضافةً إلى ذلك، لا حاجة لاستخدام مذيبات عضوية مثل الفينول والأسيتون.

إجراء

تُحلل الخلايا أو الأنسجة أولاً وتُجانس في محلول RLT، الذي يُعطل فوراً إنزيمات DNases وRNases بالإضافة إلى البروتيازات لضمان عزل الحمض النووي DNA والحمض النووي RNA والبروتينات بشكل سليم. ثم يُمرر المستخلص عبر عمود AllPrep DNA الدوار. يسمح هذا العمود، بالاشتراك مع المحلول الملحي عالي التركيز، بالارتباط الانتقائي والفعال للحمض النووي الجينومي. يُغسل العمود، ثم يُستخلص الحمض النووي DNA النقي والجاهز للاستخدام.

يُضاف الإيثانول إلى السائل الخارج من عمود الطرد المركزي AllPrep DNA لتوفير ظروف ارتباط مناسبة للحمض النووي الريبي (RNA)، ثم تُطبّق العينة على عمود الطرد المركزي RNeasy، حيث يرتبط الحمض النووي الريبي الكلي بالغشاء وتُزال الملوثات بكفاءة. بعد ذلك، يُستخلص الحمض النووي الريبي عالي الجودة في ماء خالٍ من إنزيم RNase.

يُضاف محلول الترسيب المائي الجديد للبروتينات، Buffer APP، إلى السائل المار عبر عمود الطرد المركزي RNeasy، ثم تُفصل البروتينات المترسبة بالطرد المركزي. تُذاب البروتينات الكاملة في محلول منظم مناسب، لتصبح جاهزة للاستخدام في التطبيقات اللاحقة. تتضمن المجموعة محلول Buffer ALO، المتوافق مع تقنية SDS-PAGE، لإذابة راسب البروتين. (انظر مخطط "إجراء AllPrep DNA/RNA/Protein").

التطبيقات

- تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي
- تحليل RT-PCR في الوقت الحقيقي

تُسهّل مجموعة AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit عملية تحضير العينات من خلال تمكين التنقية المتزامنة للحمض النووي الجينومي، والحمض النووي الريبوزي الكلي، والبروتين الكلي من نفس عينة الخلية أو النسيج. يُعد البروتين الكلي المُنقّى باستخدام هذه المجموعة مناسبًا لتقنية SDS-PAGE وتقنية Western blotting. كما يُحقق الحمض النووي الجينومي والحمض النووي الريبوزي الكلي المُنقّى باستخدام مجموعة AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit نتائج مثالية في جميع التطبيقات اللاحقة، بما في ذلك: