شركة كياجين، 80204، مجموعة أدوات تحضير الحمض النووي/الرنا المصغرة (50)

لـ 50 تحضيرًا مصغرًا: أعمدة AllPrep DNA الدوارة، وأعمدة RNeasy الدوارة المصغرة، وأنابيب التجميع، وماء خالٍ من إنزيم RNase، ومحاليل منظمة.

سمات

- حمض نووي DNA وحمض نووي RNA عالي الجودة من نفس العينة
- الحصول على أقصى قدر من الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA من العينات الثمينة
- تنقية سريعة باستخدام بروتوكول قصير ومبسط
- بروتوكولات مبسطة لألواح 96 بئراً
- حمض نووي DNA وحمض نووي RNA جاهزان للاستخدام في أي تحليل لاحق

تفاصيل المنتج

تتيح مجموعات AllPrep DNA/RNA تنقية الحمض النووي الجينومي والحمض النووي الريبوزي الكلي من كل عينة من الخلايا أو الأنسجة في آنٍ واحد. ولأنه لا حاجة لتقسيم كل عينة إلى قسمين لإجراء عمليات تنقية منفصلة، ​​يُمكن تحقيق أقصى قدر من إنتاجية الحمض النووي والحمض النووي الريبوزي. ويتم استخلاص الحمض النووي والحمض النووي الريبوزي المنقى بشكل منفصل.

يمكن أتمتة مجموعات AllPrep DNA/RNA Micro و Mini Kits على جهاز QIAcube Connect. وتُعدّ مجموعة AllPrep DNA/RNA 96 Kit مناسبة تمامًا لتنقية الحمض النووي الجينومي والحمض النووي الريبوزي الكلي من 96 عينة على نطاق واسع.

أداء

نسيج (5 ملغ): كمية الحمض النووي (ميكروغرام)*
القلب: 3.89
الدماغ: 2.60
الكلى: 11.33
الكبد: 32.40
الرئة: 9.65
الطحال: 20.50
الغدة الزعترية: 34.90
الأمعاء: 26.71

نسيج الفئران: قيمة RIN*
الكبد: 9.4
الرئة: 9.5
الطحال: 9.6
الغدة الزعترية: 10.0

يمكن معالجة عينات صغيرة من الخلايا المستنبتة والأنسجة سهلة التحلل باستخدام تقنية AllPrep DNA/RNA (انظر الجدول "الكميات المثلى من الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA من الأنسجة باستخدام مجموعة AllPrep DNA/RNA Micro Kit"). يُنقى الحمض النووي الجينومي باستخدام عمود AllPrep DNA الدوار الجديد، بينما يُنقى الحمض النووي الريبوزي الكلي باستخدام عمود RNeasy MinElute الدوار. ويُستخلص الحمض النووي الريبوزي الكلي بقيم Agilent RIN تقارب 10 بشكل روتيني من الخلايا المستنبتة. ويُظهر كل من الحمض النووي الجينومي والحمض النووي الريبوزي الكلي قياسًا كميًا موثوقًا به ضمن نطاق ديناميكي واسع (انظر الشكل "نطاق ديناميكي واسع").

الحصول على أفضل النتائج من الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA من الأنسجة باستخدام مجموعة AllPrep DNA/RNA Micro Kit

تتيح آلية عمل بسيطة استخلاص الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA من عينة واحدة. يبلغ متوسط ​​طول الحمض النووي الجينومي المنقى 15-30 كيلوبايت، ويُظهر أداءً جيدًا في تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد (انظر الشكل "تفاعل البوليميراز المتسلسل المتعدد لـ 8 أهداف"). يتميز الحمض النووي الريبوزي الكلي بجودة عالية، حيث تبلغ قيمة RIN له 10، مما يدل على سلامته (انظر الشكل "التنقية المتزامنة للحمض النووي الريبوزي الكلي والحمض النووي الجينومي" والشكل "حمض نووي ريبوزي كلي عالي الجودة").

تتيح تقنية AllPrep DNA/RNA أيضًا تنقية فعالة للحمض النووي DNA والحمض النووي RNA عالي الجودة من أنواع مختلفة من الخلايا والأنسجة بتنسيق 96 بئرًا ملائمًا (انظر الجدول "الحمض النووي RNA عالي الجودة من الأنسجة المنقاة باستخدام مجموعة AllPrep DNA/RNA 96" والشكل "التنقية المتكررة للحمض النووي DNA والحمض النووي RNA بتنسيق 96 بئرًا").

حمض نووي ريبوزي عالي الجودة من الأنسجة تم تنقيته باستخدام مجموعة AllPrep DNA/RNA 96

لا حاجة إلى هضم إضافي بواسطة RNase أو DNase (انظر الشكل "RNA بدون تلوث بالحمض النووي الجينومي") والحمض النووي المنقى مناسب للتطبيقات اللاحقة (انظر الشكل "حمض نووي عالي الجودة لتحليل PCR متعدد موثوق به").

مبدأ

- تصنيع
- الإدارة المسؤولة للمواد الكيميائية
- محتوى مستدام ضمن المنتجات ومواد التعبئة والتغليف
- التخلص من العبوة في نهاية عمرها الافتراضي

صُممت مجموعات AllPrep DNA/RNA لتنقية كلٍ من الحمض النووي الجينومي والحمض النووي الريبوزي الكلي من نفس عينة الخلية أو النسيج. ولأنها لا تتطلب تقسيم العينة إلى قسمين لإجراء عمليات تنقية منفصلة، ​​يُمكن تحقيق أقصى إنتاجية من الحمض النووي والحمض النووي الريبوزي. كما تُحقق تنقية فعّالة وعالية الجودة للحمض النووي والحمض النووي الريبوزي من أنواع أنسجة مختلفة دون الحاجة إلى هضم إضافي باستخدام إنزيمات RNase أو DNase. يتم استخلاص الحمض النووي والحمض النووي الريبوزي المنقى بشكل منفصل، ويكون جاهزًا للاستخدام في أي تطبيق لاحق. وبفضل المعالجة في تنسيق 96 بئرًا، تُعد تقنية AllPrep DNA/RNA الأداة المثالية لتحضير العينات في علم الجينوم وعلم الأحياء النظمي.

كبديل أكثر استدامة، نقدم لكم مجموعة QIAwave DNA/RNA Mini Kit. تقلل هذه المجموعة من استخدام البلاستيك والكرتون بنسبة تصل إلى 52% و58% على التوالي مقارنةً بمجموعة AllPrep DNA/RNA Mini Kit. تتميز المجموعة بأنابيب تجميع النفايات المصنوعة من بلاستيك معاد تدويره بنسبة 100%، والتي يمكن إعادة استخدامها طوال العملية. تعمل محاليل QIAwave المركزة على تقليل استهلاك البلاستيك بنسبة تصل إلى 90% لكل زجاجة. على الرغم من اختلاف الشكل، تحافظ مجموعة QIAwave Kit على سهولة الاستخدام مع نفس التركيب الكيميائي والأداء للمجموعة القياسية.

بالتعاون مع مختبر ماي جرين لاب، قمنا أيضًا بتقييم الأثر البيئي لمجموعة أدوات AllPrep DNA/RNA Mini Kit (50) ومجموعة أدوات QIAwave DNA/RNA Mini Kit (50). تهدف ملصقات عامل الأثر البيئي الصادرة عن مختبر ماي جرين لاب في إقليم العاصمة الأسترالية إلى تقييم المنتجات وتصنيفها بناءً على معايير استدامة متنوعة، تشمل ما يلي:

تُقيّم المنتجات من 1 إلى 10 باستثناء استهلاك الطاقة والمياه، حيث يُقيّم كل منهما بنقطة واحدة لكل كيلوواط ساعة أو جالون على التوالي. تشير الدرجة المنخفضة إلى تأثير بيئي أقل (انظر الشكل "ملصق عامل التأثير البيئي لمجموعات الحمض النووي DNA/RNA المصغرة (50) في الولايات المتحدة والاتحاد الأوروبي والمملكة المتحدة").

إجراء

تتيح عملية بسيطة باستخدام عمود الطرد المركزي تنقية الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA عاليي الجودة من نفس العينة (انظر مخطط "إجراء AllPrep DNA/RNA"). يمكن معالجة كل من الخلايا المستنبتة والأنسجة سهلة التحلل. يُنقى الحمض النووي الجينومي باستخدام عمود الطرد المركزي AllPrep DNA المبتكر، بينما يُنقى الحمض النووي الريبوزي RNA الكلي باستخدام عمود الطرد المركزي RNeasy Mini أو RNeasy MinElute (مجموعة AllPrep DNA/RNA Micro Kit).

عند تفتيت الأنسجة وتجانسها في محلول RLT Plus (المرفق مع مجموعتي AllPrep DNA/RNA Micro Kit و Allprep DNA/RNA Mini Kit)، قد يحدث تكوّن رغوة زائدة (مع العلم أن هذا لا ينطبق على مجموعة Allprep DNA/RNA 96 Kit لأنها مزودة بمحلول RLT). يمكن تقليل هذه الرغوة بشكل ملحوظ بإضافة كاشف DX (المرفق بشكل منفصل) إلى محلول RLT Plus بتركيز نهائي 0.5% (حجم/حجم) قبل بدء التفتيت والتجانس. تم اختبار كاشف DX بدقة مع المجموعات، وهو لا يؤثر على نقاء الحمض النووي الريبوزي (RNA) أو على التطبيقات اللاحقة مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي الكمي (RT-PCR). يمكن تخزين محلول RLT Plus المحتوي على كاشف DX في درجة حرارة الغرفة (15-25 درجة مئوية) لمدة 9 أشهر على الأقل.

يُتيح بروتوكول إضافي إمكانية تنقية البروتين بشكل اختياري. أما في التجارب التي يتم فيها تحضير الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبي RNA والبروتين بشكل منتظم من كل عينة، فيمكن استخدام مجموعة AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit بدلاً من ذلك.

للمعالجة عالية الإنتاجية، تُستخدم صفائح التنقية ذات 96 بئرًا من مجموعة AllPrep DNA/RNA 96 لكلٍ من الحمض النووي DNA والحمض النووي RNA. تتم معالجة هذه الصفائح بسرعة وسهولة باستخدام جهاز طرد مركزي (Centrifuge 4-16 و Plate Rotor 2 x 96) أو باستخدام مزيج من جهاز التفريغ (QIAvac 96) وجهاز الطرد المركزي. ويمكن معالجة كلٍ من الخلايا المستنبتة والأنسجة سهلة التحلل.

تُشكّل مجموعات AllPrep DNA/RNA جزءًا من حلول QIAGEN لتحضير العديد من المواد التحليلية من العينة نفسها. تشمل هذه المجموعات كاشف Allprotect Tissue Reagent، الذي يُثبّت الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA والبروتين في الأنسجة، وكاشف RNAprotect Cell Reagent، الذي يُثبّت الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA في الخلايا. يوفر كلا الكاشفين تثبيتًا فوريًا في درجة حرارة الغرفة. أما بالنسبة للأنسجة، فيُتيح نظاما TissueRuptor وTissueLyser تفتيتًا سريعًا بمعدلات إنتاجية تتراوح من المنخفضة إلى العالية.

التطبيقات

يبلغ متوسط ​​طول الحمض النووي الجينومي المنقى 15-30 كيلوبايت، اعتمادًا على ظروف التجانس، وهو مناسب لأي تطبيق، بما في ذلك التسلسل من الجيل التالي، وتحليلات ساوثرن، والبقعة النقطية، والبقعة الشقّية؛ و PCR و PCR المتعدد.

يمكن استخدام الحمض النووي الريبي الكلي المنقى في أي تطبيق، مثل تسلسل الحمض النووي الريبي RT-PCR و RT-PCR في الوقت الحقيقي؛ والعرض التفاضلي؛ وتخليق الحمض النووي التكميلي؛ وتحليلات التلطيخ الشمالي والنقطة والفتحة؛ والمصفوفات الدقيقة.

يسمح بروتوكول إضافي بتنقية البروتين بشكل اختياري. يتم تسخين البروتين المنقى وتفكيك بنيته، ويمكن استخدامه في تطبيقات مثل SDS-PAGE، والتلطيخ الغربي، والرحلان الكهربائي ثنائي الأبعاد.