Qiagen، 873121، مجموعة تفاعل البوليميراز المتسلسل ثيراسكرين PIK3CA RGQ (24)

لـ ٢٤ تفاعلًا: ٦ مزيجات تفاعل، عينة تحكم موجبة، بوليميراز الحمض النووي Taq، ماء لعينة التحكم السالبة، وماء لتخفيف العينة

سمات

- الكشف الموثوق عن الطفرات ذات الأهمية السريرية في جين PIK3CA
- حساسية ونوعية عاليتان
- تظهر النتائج في أقل من يومي عمل
- مواد كيميائية جاهزة للاستخدام ومخاليط تفاعل
- تحليل البيانات الآلي باستخدام برنامج Rotor-Gene AssayManager v2.1

تفاصيل المنتج

مجموعة therascreen PIK3CA RGQ PCR هي اختبار PCR تشخيصي نوعي في الوقت الحقيقي في المختبر للكشف عن 11 طفرة في جين الوحدة الفرعية التحفيزية ألفا (PIK3CA) باستخدام عينة من الحمض النووي المستخلص إما من نسيج ورم الثدي المثبت بالفورمالين والمضمن في البارافين (FFPE) أو بلازما الدم المضادة للتخثر K2 EDTA، المأخوذة من مريض مصاب بسرطان الثدي.

تُعد مجموعة therascreen PIK3CA RGQ PCR Kit أول اختبار تشخيصي مصاحب (CDx) معتمد من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية للمساعدة في اختيار المرضى المصابين بسرطان الثدي الذين قد يكونون مؤهلين للعلاج باستخدام مثبط PI3K الانتقائي ألفا، PIQRAY (alpelisib)، بالاشتراك مع مضاد مستقبلات الإستروجين، fulvestrant.

أداء

مجموعة ثيرا سكرين PIK3CA RGQ PCR - للأنسجة
إيجابي: سلبي
مجموعة اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل PIK3CA RGQ من ثيراسكرين - البلازما: إيجابية
سلبي: 149
غير صالح: 0
المجموع: 328

مقياس الاتفاق: نسبة الاتفاق % (عدد الحالات)
نسبة الاتفاق الإيجابي (PPA): 55% (179/328)
نسبة الاتفاق السلبي (NPA)*: 97% (209/215)
نسبة الاتفاق الإجمالية (OPA): 72% (388/543)

كانت دراسة SOLAR-1 (CBYL719C2301) تجربة سريرية دولية متعددة المراكز من المرحلة الثالثة، عشوائية، مزدوجة التعمية، مضبوطة بالغفل، قارنت بين العلاج بـ PIQRAY بالإضافة إلى فولفيسترانت، والعلاج الوهمي بالإضافة إلى فولفيسترانت، لدى الرجال والنساء بعد انقطاع الطمث المصابين بسرطان الثدي المتقدم إيجابي مستقبلات الهرمونات وسلبي HER2، والذين تفاقمت حالتهم أثناء أو بعد العلاج بمثبطات الأروماتاز. تم تسجيل 572 مريضًا بسرطان الثدي في مجموعتين، إحداهما مصابة بطفرة PIK3CA والأخرى غير مصابة بها. تم توزيع المرضى عشوائيًا بنسبة 1:1 لتلقي PIQRAY بجرعة 300 ملغ بالإضافة إلى فولفيسترانت، أو العلاج الوهمي بالإضافة إلى فولفيسترانت. كانت نقطة النهاية الأولية هي البقاء على قيد الحياة دون تفاقم المرض (PFS)، والذي تم تحديده باستخدام معايير RECIST v1.1، بناءً على تقييم الباحث.

النتائج باستخدام عينات الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين

أظهرت دراسة SOLAR-1 أن العلاج بـ PIQRAY مع فولفيسترانت لدى المرضى الذين تحمل أورامهم طفرات محددة في جين PIK3CA، أدى إلى إطالة متوسط ​​فترة البقاء على قيد الحياة الخالية من تطور المرض بمقدار 5.3 أشهر (11 شهرًا إجمالًا) مقارنةً بالعلاج الوهمي مع فولفيسترانت، كما قلل من خطر تطور المرض أو الوفاة بنسبة 35% تقريبًا. وأظهر تحليل مجموعة فرعية من المرضى الذين يحملون طفرات PIK3CA في اختبار CDx (347 مريضًا) أن المرضى الذين تلقوا PIQRAY مع فولفيسترانت انخفض لديهم خطر تطور المرض أو الوفاة بنسبة 36% تقريبًا (نسبة الخطر = 0.64؛ فاصل الثقة 95%: 0.48، 0.85) مقارنةً بالمرضى الذين تلقوا العلاج الوهمي مع فولفيسترانت.

وعلى النقيض من ذلك، تم تقدير البقاء الخالي من التقدم أيضًا في مجموعة المرضى السلبية لـ therascreen PIK3CA RGQ PCR Kit ولم يتم ملاحظة أي فائدة للبقاء الخالي من التقدم في هؤلاء المرضى (HR = 0.85؛ 95% CI: 0.58، 1.25).

وبالتالي فإن أهمية تحديد حالة طفرة PIK3CA عند تحديد المرضى للعلاج باستخدام PIQRAY بالإضافة إلى فولفيسترانت واضحة؛ فمن المرجح أن يشهد المرضى الذين تحتوي أورامهم على طفرات PIK3CA قابلة للتنفيذ زيادة ذات دلالة سريرية في فترة البقاء على قيد الحياة الخالية من التقدم.

النتائج باستخدام عينات البلازما

تم اختبار عينات البلازما السريرية الكاملة الوريدية الطرفية المعالجة بمضاد التخثر K 2 EDTA التي تم جمعها من مرضى سرطان الثدي الذين تم اختيارهم عشوائيًا في SOLAR-1 قبل بدء علاج الدراسة (الأساس) بأثر رجعي باستخدام مجموعة therascreen PIK3CA RGQ PCR لتقييم التوافق بين نتائج الأنسجة والبلازما.

من بين 328 مريضًا كانت نتائج فحص الأنسجة لديهم إيجابية باستخدام مجموعة اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي PIK3CA RGQ، كانت نتائج فحص البلازما إيجابية لدى 179 مريضًا. ومن بين 215 مريضًا كانت نتائج فحص الأنسجة لديهم سلبية باستخدام مجموعة اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي PIK3CA RGQ، كانت نتائج فحص البلازما سلبية لدى 209 مرضى. لم تُسجّل أي نتائج غير صالحة لفحص البلازما (الجدول 1).

تم حساب نسبة التوافق (PPA، NPA، وOPA) بين نتائج بلازما الدم ونتائج أنسجة مجموعة اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل PIK3CA RGQ PCR باستخدام نتائج أنسجة المجموعة كمرجع (الجدول 2). وكانت التقديرات النقطية لنسب التوافق (PPA، NPA، وOPA) 55%، 97%، و72% على التوالي.

وبالتالي فإن مجموعة therascreen PIK3CA RGQ PCR تتيح اختيارًا موثوقًا به لمرضى سرطان الثدي الذين يعانون من تغيرات PIK3CA والذين قد يكونون مؤهلين للعلاج باستخدام PIQRAY.

مبدأ

تتألف مجموعة ثيرا سكرين PIK3CA RGQ PCR من ستة مزيجات تفاعل؛ تفاعل تحكم واحد يستهدف الإكسون 15، وخمسة تفاعلات خاصة بالطفرات تُستخدم للكشف عن 11 طفرة في الإكسونات 7 و9 و20 من جين PIK3CA (الإكسون 7: C420R؛ الإكسون 9: E542K؛ E545A، E545D [1635G>T فقط]، E545G، E545K، Q546E، Q546R؛ والإكسون 20: H1047L، H1047R، H1047Y). تتيح تقنية الكشف عن الأليلات تحديدًا دقيقًا وقابلًا للتكرار بدرجة عالية للطفرات؛ حيث يتم تضخيم الحمض النووي بشكل انتقائي باستخدام بادئات ومجسات ومثبتات PCR من نوع ARMS، مع كشف إشارة حساس باستخدام جهاز Rotor-Gene Q MDx (الولايات المتحدة). يتم إعداد تقارير النتائج بشكل آلي بالكامل. إذا كانت كل من عناصر التحكم في التشغيل ونتائج العينة صالحة، فإن مجموعة therascreen PIK3CA RGQ PCR تحدد نوعيًا حالة الطفرة في عينات الحمض النووي وتبلغ عما إذا كانت العينة تحتوي على طفرة (طفرات).

إجراء

تبدأ عملية الاختبار البسيطة والمباشرة باستخلاص الحمض النووي يدويًا إما من نسيج ورم الثدي المُثبَّت بالفورمالين والمُضمَّن في البارافين (باستخدام مجموعة QIAamp DSP DNA FFPE Tissue Kit) أو من بلازما الدم المُعالجة بمضاد التخثر K2 EDTA (باستخدام مجموعة QIAamp DSP Circulating Nucleic Acid Kit)، يليها تفاعل البوليميراز المتسلسل عالي الحساسية في الوقت الحقيقي (PCR) على جهاز Rotor-Gene Q MDx (الولايات المتحدة). يحدد برنامج Rotor-Gene AssayManager الطفرات بسرعة ودقة، ويُبلغ عن النتائج، مُعلمًا مُشغل النظام بوجود طفرة واحدة أو أكثر من الطفرات الإحدى عشرة التي تم الكشف عنها بواسطة المجموعة. تُعد هذه المجموعة اختبارًا نوعيًا يُمكن أن يُعطي نتائج في أقل من يومي عمل.

التطبيقات

تُمكّن مجموعة أدوات ثيرا سكرين PIK3CA RGQ PCR من الكشف النوعي عن 11 طفرة في جين PIK3CA للاستخدام في التشخيص المختبري. وهي عبارة عن فحص تشخيصي مصاحب معتمد من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية لتحديد المرضى المصابين بسرطان الثدي الذين يحملون طفرات جينية قابلة للاستهداف، والذين قد يكون العلاج بدواء PIQRAY (ألبيلسيب) مناسبًا لهم.