Product Description
1000 ميكرولتر من إنزيم ربط الحمض النووي Tth بتركيز 5 وحدات/ميكرولتر، و2500 ميكرولتر من محلول ربط الحمض النووي Tth بتركيز 10x. درجة حرارة التخزين: يُحفظ عند -20 درجة مئوية. لن يؤثر ما يصل إلى 20 دورة إذابة على أداء محلول ربط الحمض النووي Tth بتركيز 10x.
سمات
- يتميز بثبات حراري عالٍ يسمح بالربط باستخدام ظروف التهجين عالية الدقة
- يتميز بدرجة عالية من الخصوصية والدقة تسمح بالكشف الحساس عن تعدد أشكال النوكليوتيدات المفردة (SNPs).
تفاصيل المنتج
يحفز إنزيم Tth DNA Ligase تكوين روابط فوسفاتية ثنائية الإستر بين نهايتي 3'-هيدروكسيل و5'-فوسفات المتجاورتين في الحمض النووي المزدوج، وذلك اعتمادًا على NAD. وهو غير فعال ضد الحمض النووي أحادي السلسلة أو الحمض النووي الريبي (RNA) أو الحمض النووي ذي النهايات غير المتداخلة. وقد تم عزل هذا الإنزيم من سلالة الإشريكية القولونية التي تحتوي على بلازميد يحمل جين إنزيم ربط الحمض النووي من بكتيريا Thermus thermophilus.
يتم تزويده بـ 50 ملي مولار من Tris-HCl (الأس الهيدروجيني 7.5)، و100 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و0.1 ملي مولار من EDTA، و0.1% من Triton X-100، و1 ملي مولار من DTT، و50% من الجلسرين.
تحفز وحدة واحدة من إنزيم Tth DNA Ligase ربط 50% من مواقع cos الموجودة في 1 ميكروغرام من الحمض النووي لفيروس لامدا البكتيري في دقيقة واحدة عند درجة حرارة 45 درجة مئوية. وتعادل وحدة واحدة من إنزيم Tth DNA Ligase 15 وحدة طرفية متماسكة (CEU).
أداء
الفحص: المواصفات
نشاط الليغاز: ناجح
لم يتم الكشف عن أي تلوث بإنزيم ديوكسي ريبونيوكلياز.
نشاط الإكسونوكلياز: لم يتم الكشف عن أي نشاط.
نشاط الإندونوكلياز: لم يتم الكشف عن أي نشاط.
مبدأ
إنزيم Tth DNA Ligase مستقر ونشط ضمن نطاق درجة حرارة الربط الأمثل الذي يتراوح بين 45 و65 درجة مئوية، أي أعلى بمقدار 7 إلى 10 درجات مئوية من إنزيم T4 DNA ligase. تحدد درجة انصهار الركائز درجة حرارة الربط النهائية للتفاعل. وتؤدي درجة حرارة الربط العالية إلى منع الربط غير النوعي.
إجراء
ضبط الجودة
يُقاس نشاط إنزيم Tth DNA ligase في تفاعل يحتوي على 1 ميكروغرام من الحمض النووي لفيروس لامدا البكتيري المهضوم بواسطة إنزيمي SalI وSmaI (حمض نووي ضابط)، ومحلول منظم Tth Ligation Buffer بتركيز 1x، وكميات متفاوتة من الإنزيم لمدة 100 دقيقة عند 450 درجة مئوية. تُحلل النتائج باستخدام الرحلان الكهربائي على هلام الأغاروز. المنتج خالٍ من نوكليازات الحمض النووي غير النوعية. تُحلل النتائج أيضًا باستخدام الرحلان الكهربائي على هلام الأغاروز بعد حضانة 1 ميكروغرام من ركيزة الحمض النووي مع 5 وحدات من إنزيم Tth ligase لمدة 4 ساعات عند 700 درجة مئوية.
التطبيقات
- تفاعل سلسلة الليغاز (LCR)
- تفاعل الكشف عن الليغاز (LDR)
- تسلسل الحمض النووي من الجيل التالي (NGS)
- الكشف عن التوسع المتكرر (أحمر)
- تضخيم الدائرة المتدحرجة (RCA)
- اختبار ربط التقارب (PLA)
يُستخدم هذا في تطبيقات مثل:
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924