Qiagen، RP905A، TaqNova HS DNA Polymerase (500 وحدة)

بوليميراز الحمض النووي TaqNova HS، محلول تفاعل TaqNova HS بتركيز 10x، كلوريد المغنيسيوم بتركيز 50 ملي مولار. درجة حرارة التخزين: -20 درجة مئوية

سمات

- يحفز تخليق الحمض النووي في اتجاه 5' → 3'
- لا يُظهر نشاط إكسونوكلياز من 3′ إلى 5′ ولكنه يمتلك نشاط إكسونوكلياز من 5′ إلى 3′
- يتيح إعدادًا سهلاً لتفاعل PCR ذي البداية الساخنة في درجة حرارة الغرفة
- يقلل من تضخيم المنتجات غير المحددة وثنائيات البادئات
- يقوم بتضخيم أجزاء يصل طولها إلى 5 كيلوبايت ويترك نهايات بارزة من نوع "A".

تفاصيل المنتج

إنزيم TaqNova HS DNA Polymerase عبارة عن مزيج من إنزيم Taq DNA بوليميراز المُعاد تركيبه والمقاوم للحرارة والمستخلص من بكتيريا Thermus aquaticus، بالإضافة إلى جسم مضاد أحادي النسيلة عالي التخصص، يعمل كمثبط لنشاط البلمرة. يُمكّن TaqNovaHS من إعداد تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) ذي البداية الساخنة بسهولة في درجة حرارة الغرفة.

يُوصى باستخدامه في مجموعة واسعة من التطبيقات المعقدة التي تتطلب تضخيمًا عالي التخصص. إن بوليميراز TaqNovaHS هو بوليميراز DNA عالمي وسهل الاستخدام، يعمل بسرعة وكفاءة في مختلف ظروف تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). يحفز هذا الإنزيم تخليق DNA في اتجاه 5' → 3'، ولا يُظهر نشاطًا خارجيًا نوكليازيًا من 3' إلى 5'، ولكنه يمتلك نشاطًا خارجيًا نوكليازيًا من 5' إلى 3'.

يتم تزويده بـ 20 ملي مولار من Tris-HCl (الأس الهيدروجيني 8.0، 25 درجة مئوية)، 100 ملي مولار من KCl، 0.1 ملي مولار من EDTA، 1 ملي مولار من DTT، 0.5% (حجم/حجم) من Nonidet P40، 0.5% (حجم/حجم) من Tween 20، 50% (حجم/حجم) من الجلسرين.

تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم المطلوبة لدمج 10 نانومول من dNTPs في جزء DNA غير قابل للذوبان في 30 دقيقة عند 75 درجة مئوية في تفاعل 50 ميكرولتر.

أداء

الفحص: المواصفات
النشاط الوظيفي: ناجح
لم يتم الكشف عن أي تلوث بإنزيم ديوكسي ريبونيوكلياز.

مبدأ

يرتبط الجسم المضاد بالإنزيم بشكل عكسي، مما يثبط نشاط البوليميراز في درجات الحرارة المحيطة، ويمنع استطالة البادئات غير المرتبطة بشكل نوعي وثنائيات البادئات المتكونة في درجات حرارة منخفضة أثناء تحضير تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). ينفصل الجسم المضاد عن البوليميراز خلال ظروف التدوير العادية. لا يتطلب استخدام بوليميراز TaqNovaHS أي خطوة حضانة إضافية لتنشيط الإنزيم.

إجراء

ضبط الجودة

تم تقييم نشاط إنزيم ديوكسي ريبونيوكلياز (DNase) وتلوث الحمض النووي (DNA) عن طريق حضانة 1 ميكروغرام من الحمض النووي مع 10 وحدات من الإنزيم لمدة 4 ساعات عند 37 درجة مئوية. وتمت معاينة النتائج على هلام أجاروز مصبوغ ببروميد الإيثيديوم. وخضع المنتج لاختبارات مكثفة في تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR).

التطبيقات

- بدء التشغيل الساخن وتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي
- تفاعل البوليميراز المتسلسل أحادي ومتعدد الأهداف
- تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) باستخدام الحمض النووي المستخلص من أنواع مختلفة من العينات
- تضخيم محدد للقوالب الصعبة (الغنية بالـ GC)

يُستخدم هذا في تطبيقات مثل: