Revvity، 61P02KAZ، HTRF مضاد للفوسفور-AKT (سيرين/ثريونين) متعدد النسائل مقترن باليوروبيوم، 10000 نقطة اختبار

ملخص
يُعدّ الجسم المضاد متعدد النسائل المُوسَم، والمُضاد لركيزة AKT المُفسفرة والمُرتبط بـ Eu cryptate، جسمًا مضادًا متعدد النسائل يُتيح الكشف عن بروتين Akt عند فسفرته عند سيرين أو ثريونين مسبوقًا بالأرجينين أو الليسين في الموضعين -5 و-3. لا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع سيرين أو ثريونين المُفسفر في تكوينات مختلفة (تفاعلات متقاطعة طفيفة مع الموضعين -2 و+2). كما أنه لا يكشف عن بروتين Akt غير المُفسفر. يُتيح ذلك إمكانية تصميم اختبار كيميائي حيوي مُحدد للكيناز. يُمكن استخدام أي نوع من الركائز، بدءًا من الببتيدات الاصطناعية الصغيرة وصولًا إلى الركائز الطبيعية، مما يُوفر تنوعًا كبيرًا في الكشف. كما تُتيح تقنية HTRF إجراء الاختبار عند تركيزات ATP الفيزيولوجية.
كيف يعمل؟
مبدأ الفحص
تستخدم فحوصات كيناز HTRF عادةً مزيجًا من جسم مضاد مضاد للفوسفور المتبقي موسوم باليوروبيوم-كريبتات، SA-XL665، وركيزة مُبَيوْتَنة*. تتناسب الإشارة طرديًا مع تركيز الفوسفور المتبقي. *بدلاً من ذلك، يمكن استخدام علامات أخرى مثل 6HIS أو GST أو c-myc أو DNP أو FLAG لوسم ركيزة الكيناز.

بروتوكول الفحص
تتألف فحوصات كيناز HTRF من مرحلتين أساسيتين: 1. المرحلة الإنزيمية: يُحضن الركيزة المُؤشَّرة بالبيوتين مع الكيناز المطلوب ومع المركبات بوجود عوامل مساعدة. يبدأ التفاعل بإضافة ATP. 2. مرحلة الكشف: تُكشف الركيزة المُؤشَّرة بالبيوتين والمُفسفرة بإضافة ستربتأفيدين-XL665 وPAb Anti-phospho AKT substrate-Eu cryptate، المُحضَّر في محلول منظم يحتوي على EDTA لإيقاف التفاعل الإنزيمي. التطبيق: فحص إنزيمي كيميائي حيوي
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - كاشف فلوري
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الفئة المستهدفة: الكيناز
تقنية TR-FRET
المجالات العلاجية: أمراض القلب والأوعية الدموية، الأمراض المعدية، الالتهابات، الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات، الأمراض النادرة
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل