Revvity، 61P06KAZ، HTRF مضاد أحادي النسيلة للفوسفور-IκBα مقترن باليوروبيوم، 10000 نقطة اختبار

ملخص
يُعدّ الجسم المضاد أحادي النسيلة المُوسَم بـ I kappa B alpha-Eu cryptate المضاد للفوسفور، والذي يُتيح الكشف السريع عن I kappa B alpha فقط عند فسفرته عند Ser32/36، ولا يتفاعل مع التسلسل غير المُفسفر المقابل. وهذا يسمح بإنشاء اختبار كيميائي حيوي عالي التخصص للكيناز. يُمكن استخدام أي نوع من الركائز، بدءًا من الببتيدات الاصطناعية الصغيرة وصولًا إلى الركائز الطبيعية، مما يعني تنوعًا كبيرًا في الكشف. وبما أن تقنية HTRF تتحمل تركيزات عالية للغاية من ATP، يُمكن إجراء الاختبار عند تركيزات ATP الفيزيولوجية.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:

تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ الفحص
تستخدم فحوصات كيناز HTRF عادةً مزيجًا من جسم مضاد مضاد للفوسفور المتبقي موسوم باليوروبيوم-كريبتات، SA-XL665، وركيزة مُبَيوْتَنة*. تتناسب الإشارة طرديًا مع تركيز الفوسفور المتبقي. *بدلاً من ذلك، يمكن استخدام علامات أخرى مثل 6HIS أو GST أو c-myc أو DNP أو FLAG لوسم ركيزة الكيناز.

بروتوكول الفحص
تتألف فحوصات كيناز HTRF من مرحلتين أساسيتين: 1. المرحلة الإنزيمية: يُحضن الركيزة المُؤشَّرة بالبيوتين مع الكيناز المطلوب ومع المركبات بوجود عوامل مساعدة. يبدأ التفاعل بإضافة ATP. 2. مرحلة الكشف: تُكشف الركيزة المُؤشَّرة بالبيوتين والمُفسفرة بإضافة ستربتأفيدين-XL665 وMAb Anti-phospho I kappa B alpha-Eu cryptate، المُحضَّر في محلول منظم يحتوي على EDTA لإيقاف التفاعل الإنزيمي. التطبيق: فحص إنزيمي كيميائي حيوي
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - كاشف فلوري
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الفئة المستهدفة: الكيناز
تقنية TR-FRET
المجالات العلاجية: أمراض القلب والأوعية الدموية، الأمراض المعدية، الالتهابات، الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات، الأمراض النادرة
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل