مجموعة Revvity، 62EUSPEA، HTRF لوضع العلامات على اليوروبيوم

ملخص
تُعدّ مجموعة وسم الكريبتات مناسبةً لوسم الببتيدات والبروتينات والأوليغونوكليوتيدات بسرعة وسهولة باستخدام كريبتات اليوروبيوم. صُممت هذه المجموعة لتلبية احتياجات الوسم السريع بكميات صغيرة جدًا، مثل تحديد أفضل جسم مضاد من بين عدة أجسام مضادة متاحة لتطوير اختبار HTRFassay.
يتفاعل مركب اليوروبيوم-تريسبايبيريدين (TBP) المنشط بواسطة N-هيدروكسي سكسينيميد مع الأمينات الأولية التي تحملها الجزيئات الحيوية لوضع العلامات، من أجل عملية اقتران مبسطة.
تتضمن المجموعة جميع المواد اللازمة لإجراءات وضع العلامات (باستثناء أجهزة غسيل الكلى وأجهزة التركيز).
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:

تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ الفحص
تُجرى عملية الوسم في ظروف معتدلة للغاية. وكما هو موضح هنا، تتضمن العملية خطوة حضانة مع الصبغة المجففة، تليها عملية تنقية باستخدام عمود قابل للاستخدام لمرة واحدة. تحتوي المجموعة على كل من عمود التنقية والمحلول المنظم لتنقية المركب، بالإضافة إلى معاير لتحديد التخفيف الأمثل للمادة الموسومة في فحوصات HTRF. وبناءً على الوزن الجزيئي للجزيء المستهدف وطبيعة الصبغة، تُمكّن كل مجموعة من وسم كميات تتراوح بين 5-25 ميكروغرام (بروتين - الوزن الجزيئي 15 كيلو دالتون) و50-250 ميكروغرام (جسم مضاد - الوزن الجزيئي 150 كيلو دالتون).

بروتوكول الفحص
يُشرح إجراء الوسم على اليمين. يُضاف 50 ميكرولتر من الجزيء المستهدف (6.67 ميكرومولار) في محلول فوسفات منظم عند درجة حموضة 8.0 إلى قارورة كريبتات اليوروبيوم. بعد حضانة لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة، يُفصل البروتين الموسوم على عمود مُعاير. بعد التخلص من 700 ميكرولتر من محلول الفصل، يُجمع الجزيء الموسوم في جزء حجمه 400 ميكرولتر.
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
مجموعة المنتجات - كاشف فلوري
شروط الشحن - يتم الشحن في درجة حرارة الغرفة
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - طقم واحد