Product Description
ملخص
يكشف اختبار ارتباط GTP Gi عن نشاط بروتين Gi في الجزء العلوي من المستقبل، عند تحفيز مستقبلات البروتين المقترن بالبروتين ج في مستخلصات الأغشية. يتميز هذا الاختبار غير النظائري القائم على تقنية HTRF بالبساطة والسرعة، كما أنه لا يتطلب غسلاً. يُستخدم هذا الاختبار في دراسات نماذج مستقبلات البروتين المقترن بالبروتين ج، وفي تحديد خصائص المركبات الدوائية وتوصيفها.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص ارتباط GTP Gi
يستخدم اختبار ارتباط GTP ببروتين Gi نظير GTP موسومًا بالكريبتات (المانح) وجسمًا مضادًا لبروتين Gi موسومًا بـ d2 (المستقبل). يرتبط نظير GTP تحديدًا بجيب ارتباط GTP في بروتينات G النشطة، بينما يرتبط الجسم المضاد الموسوم بـ d2 تحديدًا بالوحدة الفرعية Gαi من بروتينات G. يؤدي تنشيط مستقبلات البروتين المقترن ببروتين G (GPCR) في وجود كاشفي الكشف إلى تقريب المانح والمستقبل، مما يُحفز إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET) بكثافة تتناسب مع تركيز بروتين Gi النشط في العينة. يُستخدم GTP γS، وهو نظير GTP غير قابل للتحلل، لإزاحة المانح من جيب ارتباط GTP وإخماد إشارة FRET لتحديد الإشارة غير النوعية للاختبار وضمان دقته.
بروتوكول فحص لوحة ربط GTP Gi
يُجرى اختبار ارتباط GTP ببروتين Gi في شكل مصغر باستخدام حجم نهائي قدره 20 ميكرولتر، ويتميز ببروتوكول مبسط لإضافة الكواشف من أربع خطوات، حيث تُضاف مركبات التحفيز، والمنشط، وكواشف الكشف، والأغشية تباعًا. تُقرأ النتائج بعد حضانة لمدة 3 ساعات أو تشغيلها في درجة حرارة الغرفة، وذلك حسب النموذج البيولوجي. لا تتطلب هذه الطريقة أي خطوات غسل.
يستخدم هذا البروتوكول ظروفًا مُحسَّنة تم تحديدها مسبقًا للنموذج البيولوجي محل الاهتمام (كمية الغشاء المثلى لكل بئر، ومحلول التحفيز رقم 3 المُضاف إليه تركيزات مثلى من كلوريد المغنيسيوم وثنائي فوسفات الغوانوزين). تُعرض إجراءات التحسين والتوصيات في الأدلة المرفقة. التطبيق: الكشف عن الرسول الثانوي
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 10 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الفئة المستهدفة - مستقبلات البروتين المقترن بالبروتين ج
تقنية TR-FRET
المجالات العلاجية: أمراض القلب والأوعية الدموية، الأمراض المعدية، الالتهابات، الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات، الأمراض النادرة
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924