مجموعة Revvity، 62H4PANACPAD، HTRF EPIgeneous Human and Mouse Pan-Acetyl Histone H4 cellular Detection Kit، 10000 نقطة اختبار

ملخص
يُعدّ الهيستون 4 أحد بروتينات الهيستون الأساسية التي تُشارك - إلى جانب هيستونات أخرى - في تغليف الحمض النووي (DNA) في حالة كروماتين مكثفة. وتعتمد وظيفة الهيستون H4 على حالة أستلة الهيستون (مجموعة أستيل واحدة لكل ليسين) في عدة مواقع (Lys5، Lys8، Lys12، وLys16) على الطرف الأميني. ويرتبط اضطراب أستلة الهيستون ارتباطًا وثيقًا ببدء السرطان وتطوره، مما يجعل إنزيمات أستلة وإزالة أستلة الهيستون أهدافًا دوائية واعدة.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:

تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص الهيستون H4 الأسيتيل الكامل
يقيس اختبار Pan-Acetyl Histone H4 مستوى الهيستون H4 عند أستلته في الليسينات 5، 8، 12، و16. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يتم الكشف عن أستلة الليسينات 5، 8، 12، و16 من الهيستون H4 في اختبار ساندويتش باستخدام نوعين مختلفين من الأجسام المضادة النوعية، أحدهما موسوم بـ Eu Cryptate (المانح) والآخر بـ d2 (المستقبل). عندما تكون الصبغتان متقاربتين، يؤدي إثارة المانح بمصدر ضوئي (ليزر أو مصباح وميض) إلى حدوث نقل طاقة رنيني فلوري (FRET) باتجاه المستقبل، الذي بدوره يتألق عند طول موجي محدد (665 نانومتر). يرتبط أحد الكاشفين بالهيستون H4، بينما يرتبط الآخر بالهيستون H4 المُؤَسْتَل K5-K8-K12-K16، مما يُولِّد إشارة نقل طاقة رنين فلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُؤَسْتَل الموجود في العينة، وتُوفِّر وسيلة لتقييم حالة أسيتلة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.

بروتوكول فحص الهيستون H4 متعدد الأسيتيل ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن الهيستون H4 المؤستل بالكامل بتقنية HTRF. يسمح هذا البروتوكول بمراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.

بروتوكول فحص الهيستون H4 متعدد الأسيتيل في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن الهيستون H4 المُفسفر والمُؤَسْتَل باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يسمح هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) بالتصغير مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل EPIgeneous A
التعديل الجزيئي - الأسيتلة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 10 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
هدف الهيستون H4 متعدد الأسيتيل
الفئة المستهدفة - علم التخلق
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: علم المناعة والأورام
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل