Product Description
ملخص
يُمكّن هذا التحليل الخلوي بتقنية HTRF من الكشف السريع والكمي عن بروتين SMAD3 المُفسفر عند سيرين 423/425 كمؤشر على نشاط إشارات TGF-β. تُفعّل مستقبلات TGF-β بروتين SMAD3 مباشرةً عن طريق الفسفرة عند سيرين 423/425، مما يؤدي إلى انتقاله إلى النواة وتنظيم التعبير الجيني المُشارك في موت الخلايا المبرمج، والهجرة، والتمايز، بالإضافة إلى الاستجابات المناعية/الالتهابية وإعادة تشكيل المصفوفة خارج الخلوية.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-SMAD3 (Ser423/425)
يقيس اختبار فوسفو-SMAD3 (Ser423/425) بروتين SMAD3 عند فسفرته عند الموقعين Ser423/425. وعلى عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار فوسفو-SMAD3 (Ser423/425) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة المفسفرة على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتينات في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص فوسفو-SMAD3 (Ser423/425) ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين SMAD3 المفسفر (Ser423/425) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص فوسفو-SMAD3 (Ser423/425) في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن SMAD3 المفسفر (Ser423/425) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: أمراض القلب والأوعية الدموية، الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924