Product Description
ملخص
يُعتبر بروتين كيناز 5' المنشط بواسطة AMP (AMPK) مفتاحًا رئيسيًا لعمليات الأيض. يُنشط AMPK عن طريق الفسفرة على Thr172 بواسطة CaMKK2 وLKB1، من بين عوامل أخرى. عند تنشيطه، يُثبط AMPK تخليق الأحماض الدهنية والكوليسترول والدهون الثلاثية، ويُنشط امتصاص الأحماض الدهنية وأكسدة بيتا، بالإضافة إلى تحفيز امتصاص الجلوكوز. كما يُشارك AMPK في تنشيط الالتهام الذاتي من خلال الفسفرة المباشرة لـ ULK1. تُمكّن مجموعة Revvity الخلوية المتجانسة HTRF لـ AMPK الكلي من الكشف عن مستوى تعبير AMPK، وتُستخدم كاختبار معايرة مع مجموعتنا الخاصة بـ phospho-AMPK (Thr172).
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص AMPK الكلي
يقيس اختبار Total-AMPK مستوى التعبير عن AMPK في مستخلص خلوي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Total-AMPK جسمين مضادين موسومين: أحدهما مرتبط بفلوروفور مانح، والآخر بفلوروفور مستقبل. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود AMPK في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذه المركبات إلى تقريب الفلوروفور المانح من المستقبل، مما يُولد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول فحص AMPK الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن AMPK HTRF الكلي. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص AMPK الكلي في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن إجمالي AMPK باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924