Product Description
ملخص
يُمكّن هذا التحليل الخلوي من الكشف عن الفوسفولامبان المُفسفر (PLN) عند الثريونين 17. يُعدّ تحليل الفسفرة، إلى جانب تحليل الفوسفولامبان الكلي، مثاليًا لمراقبة تنشيط CaMKII. يؤدي ارتفاع مستوى الكالسيوم داخل الخلايا إلى تنشيط CaMKII، الذي بدوره يُفسفر الفوسفولامبان عند بقايا الثريونين 17. يُثبّط الفوسفولامبان غير المُفسفر SERCA2a، بينما يُعكس فسفرة الفوسفولامبان عند موقع السيرين 16 بواسطة PKA أو موقع الثريونين 17 بواسطة CaMKII هذا التثبيط. تُنظّم حالة فسفرة الفوسفولامبان نشاط مضخة الكالسيوم هذه.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص الفوسفوفوسفولامبان (Thr17)
يقيس اختبار فوسفو-فوسفولامبان (Thr17) مستوى الفوسفولامبان عند فسفرته عند الثريونين 17. وعلى عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار فوسفو-فوسفولامبان (Thr17) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة الفسفورية على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتينات في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص الفوسفوفوسفولامبان (Thr17) ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن فوسفو-فوسفولامبان (Thr17) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص الفوسفوفوسفولامبان (Thr17)1
يمكن الكشف عن الفوسفولامبان المفسفر (Thr17) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي - أمراض القلب والأوعية الدموية
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924