Product Description
ملخص
إنزيم ALK (كيناز اللمفوما الكشمي) هو كيناز تيروسين عبر غشائي ينتمي إلى عائلة مستقبلات الأنسولين. ينظم ALK مسارات متعددة تشارك في بقاء الخلية وتكاثرها ودورة الخلية، بما في ذلك مسارات AKT/PI3K وMAPK/ERK وSTAT3 وNFkB. يحفز كل من بليتروفين (PTN) وميدكين (MDK)، وهما من روابط ALK، فسفرة ALK وتنشيطه على مواقع تيروسين متعددة، بما في ذلك Y1604. يرتبط خلل تنظيم ALK بأنواع مختلفة من السرطانات، مثل سرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة (NSCLC) والأورام الأرومية العصبية. في الواقع، ينجم ALK المسرطن عن: 1) عمليات نقل الجينات وما يتبعها من بروتينات اندماج ALK داخل الخلايا (مثل EML4-ALK وNPM1-ALK وTPM3-ALK وVCL-ALK)؛ 2) الطفرات (مثل G263 وR401 وR551 وP968 وE1242). إن جين ALK المسبب للسرطان نشط بشكل دائم مما يؤدي إلى تنشيط غير منضبط لمسارات الإشارات اللاحقة، مما يؤدي إلى بقاء الخلايا السرطانية وتكاثرها.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-ALK (Tyr1604)
يقيس اختبار HTRF Phospho-ALK (Tyr1604) بروتين ALK عند فسفرته عند الموقع Tyr1604. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Phospho-ALK (Tyr1604) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما تم اختيار الجسم المضاد الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص الفوسفو-ALK (Tyr1604) ذو اللوحين
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين الفوسفور-ALK (Tyr1604) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص الفوسفو-ALK (Tyr1604) أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن بروتين الفوسفور-ALK (Tyr1604) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. ولا تتطلب العملية أي خطوات غسل.
يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير الحجم مع الحفاظ على جودة عالية لتقنية HTRF. تطبيق - إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 2 - محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924