Product Description
ملخص
يُعدّ ATF4 عامل نسخ محوري في مسار إشارات EIF2α/ATF-4، ويعمل كمُؤثر رئيسي في استجابة الإجهاد المتكاملة (ISR) التي تُحفزها كينازات PERK أو HRI أو GCN2 أو PKR. وبفضل نطاقه المُسمى "نطاق سحاب الليوسين" (bZIP)، يُسهّل ATF4 التفاعلات مع العديد من البروتينات، حيث يعمل كشريك في عملية التضاعف. ويمتد دوره المُتعدد الأوجه ليشمل أنسجة مُختلفة، مُؤثرًا بشكل كبير على السمنة، واستتباب الجلوكوز، وإنفاق الطاقة، وتنظيم اللدونة العصبية.
باعتباره عامل نسخ bZIP مُستحثًا بالإجهاد، يرتبط ATF4 بعنصر استجابة cAMP، مما يُشير إلى دوره في استجابة الإجهاد المتكاملة (ISR)، التي تشمل الاستجابات لنقص الأحماض الأمينية والجلوكوز، وإجهاد الشبكة الإندوبلازمية، والإجهاد التأكسدي. تتضمن هذه الاستجابة فسفرة eIF2alpha بواسطة كينازات مختلفة، مما يؤدي إلى تثبيط ترجمة mRNA بشكل عام وزيادة ترجمة ATF4. اعتمادًا على التعديلات ما بعد الترجمة والشركاء المرتبطين، يمكن لـ ATF4 إما تعزيز بقاء الخلية أو تحفيز موتها المبرمج.
بالإضافة إلى ذلك، فإن استقرار ATF4 يخضع للتنظيم من خلال عملية البولي يوبيكويتين، والتي تتوسط في تحلله بواسطة البروتيازوم.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص ATF4 الكلي
يقيس اختبار ATF4 الكلي مستوى التعبير عن بروتين ATF4 في مستخلص خلوي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار ATF4 الكلي جسمين مضادين موسومين، أحدهما مرتبط بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود بروتين ATF4 في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذين المركبين إلى تقريب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، مما يُولد إشارة نقل طاقة رنين فلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول فحص ATF4 الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن HTRF Total ATF4. يسمح هذا البروتوكول بمراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص ATF4 الكلي في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن إجمالي ATF4 باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُسهّل هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) عملية التصغير مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
محلول منظم/محلول منظم لتحلل المذيب 4
طريقة الكشف - HTRF
النوع المضيف - الإنسان
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الهدف-ATF4
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: علم الأورام العصبي
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924