Product Description
ملخص
يُعدّ البروتين ATG14، أو البروتين 14 المرتبط بالالتهام الذاتي، أو BAKOR (المنظم الرئيسي المرتبط بالالتهام الذاتي والمرتبط ببروتين بيكلين 1)، عنصرًا أساسيًا في مرحلة تكوين الجسيمات الالتهامية في عملية الالتهام الذاتي الكبيرة. عند تعرض الخلية للإجهاد، تعمل المستشعرات الحساسة للمغذيات/الطاقة mTOR وAMPK على تنشيط مُركّب ULK1، مما يسمح بفسفرة ATG14 على سيرين 29، وبالتالي يُتيح تنشيط مُركّب PIK3C3 لتكوين الجسيمات الالتهامية.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص HTRF Phospho ATG14
يقيس اختبار HTRF Phospho-ATG14 (Ser29) بروتين ATG14 عند فسفرته عند الموقع Ser 29. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Phospho-ATG14 (Ser29) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة المفسفرة على البروتين، بينما تم اختيار الجسم المضاد الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص HTRF Phospho-ATG14 Ser29 ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن الفوسفور-ATG14 Ser 29 HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص HTRF Phospho-ATG14 Ser29 أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن الفسفور ATG14 Ser 29 باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924