مجموعة Revvity، 64ATUBPEH، HTRF α-Tubulin Housekeeping Kit، 10000 نقطة تحليل

ملخص
صُمم هذا الاختبار لقياس مستوى التعبير الداخلي لبروتين ألفا-توبولين في الخلايا والأنسجة، وذلك لمعايرة البيانات المُستقاة من البروتينات المُفسفرة و/أو البروتينات الكلية محل الاهتمام. ونظرًا لدوره الأساسي في الهيكل الخلوي، يُعبر عن بروتين ألفا-توبولين بشكل واسع النطاق ودائم في جميع الأنسجة. علاوة على ذلك، فإن تسلسل الأحماض الأمينية فيه محفوظ بدرجة عالية، وبالتالي فهو متطابق في جميع الأنواع تقريبًا. هذه الخصائص تجعله أحد أكثر البروتينات المرجعية استخدامًا. يتناسب تركيزه طرديًا مع عدد الخلايا وتركيز البروتينات الكلية، ولذلك يُستخدم كعنصر تحكم داخلي لمعايرة البيانات، لتصحيح تغيرات الإشارة الناتجة عن التباين التجريبي (مثل عدد الخلايا المتبقية في طبق الزرع بعد المعالجة، أو فعالية التحلل). يُمكّن حجم العينة الصغير (4 ميكرولتر) وتوافقه مع جميع محاليل التحلل المستخدمة في تقنية HTRF من إجراء تحليل متعدد المعايير، مع الكشف عن بروتين ألفا-توبولين بالتوازي مع البروتينات المُفسفرة و/أو البروتينات الكلية في نفس المستخلص الخلوي.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص ألفا-توبولين الأساسي
يقيس اختبار ألفا-توبولين المنزلي مستوى ألفا-توبولين الداخلي في مستخلص خلوي أو نسيجي. وعلى عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار ألفا-توبولين المنزلي جسمين مضادين موسومين: أحدهما مرتبط بفلوروفور مانح، والآخر بمستقبل. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود ألفا-توبولين في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذين المركبين إلى تقريب الفلوروفور المانح من المستقبل، مما يُولد إشارة نقل طاقة رنين فلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، وتوفر وسيلة لتقييم أي تغييرات ناتجة عن التباين التجريبي في ظل نظام اختبار لا يتطلب غسلًا.

بروتوكول فحص ألفا-توبولين المنزلي ثنائي الألواح
يُجرى التحليل وفقًا لبروتوكول التحليل ثنائي الألواح، حيث تُزرع الخلايا وتُعالج في طبق زراعة. وللكشف، يُنقل 4 ميكرولتر من المستخلص الخلوي إلى صفيحة بيضاء ذات حجم منخفض مكونة من 96 أو 384 بئرًا، ويُضاف 12 ميكرولتر من مخفف المجموعة قبل إضافة 4 ميكرولتر من كواشف HTRF®. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها في طبق زراعة الخلايا المناسب. التطبيق: قياس كمية البروتين
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 4 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الفئة المستهدفة - المؤشرات الحيوية
تقنية TR-FRET
المجالات العلاجية: أمراض القلب والأوعية الدموية، الأمراض المعدية، الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات، الأمراض النادرة
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل