Product Description
ملخص
يكشف هذا الاختبار الخلوي بتقنية HTRF بسهولة ودقة عن بروتين أورورا B البشري (المرتبط بجين AURKB) الموجود في جميع حقيقيات النوى. ينتمي أورورا B إلى عائلة كينازات أورورا من نوع سيرين/ثريونين (بما في ذلك أورورا A وأورورا C)، وهي ضرورية لانقسام الخلايا من خلال تنظيم الانقسام المتساوي، وخاصة في عملية فصل الكروموسومات. يتم تنشيطه من خلال الفسفرة الذاتية لبقايا الثريونين 232، والتي تحدث بشكل رئيسي من أواخر طور S وحتى طور M خلال دورة انقسام الخلية أو استجابةً لتلف الحمض النووي. إن فرط التعبير عن كينازات أورورا في مجموعة واسعة من السرطانات (سرطان الدم، وسرطان القولون، وسرطان البروستاتا، وسرطان الثدي) يجعلها مرشحة واعدة لتطوير مثبطات كيناز أورورا (AKIs).
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-أورورا ب (ثريونين 232)
يقيس اختبار فوسفو-أورورا ب (Thr232) بروتين أورورا ب عند فسفرته عند الثريونين 232. وعلى عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار فوسفو-أورورا ب (Thr232) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة المفسفرة على البروتين، بينما تم اختيار الجسم المضاد الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين معقد مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص فوسفو-أورورا ب (ثريونين 232) ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن الفوسفور-أورورا ب (Thr232) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص فوسفو-أورورا ب (ثريونين 232) في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن بروتين أورورا ب المُفسفر (Thr232) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1 محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924