Revvity، 64BDCRBNPEH، مجموعة ربط سيربلون HTRF، 10000 نقطة اختبار

ملخص
طريقة سريعة وسهلة لتحديد الروابط الجديدة لبروتين سيربلون WT.
يُعدّ بروتين سيربلون، المعروف أيضًا باسم CRBN، أحد البروتينات الأساسية في العديد من العمليات البيولوجية، ويرتبط ارتباطًا وثيقًا بتكاثر الخلايا، وموتها المبرمج، واستقلابها، وظهور العديد من الأمراض. كما يُعدّ سيربلون أحد أشهر اثنين من إنزيمات E3 ليغاز، والتي يتم استقطابها بواسطة بروتينات PROTAC ثنائية الوظيفة لتحفيز إضافة اليوبيكويتين إلى البروتين المستهدف، ومن ثمّ تحلله بواسطة البروتيازوم. يتفاعل سيربلون مع العديد من البروتينات لتكوين مُركّب E3 يوبيكويتين ليغاز الوظيفي، حيث يعمل CRBN كمستقبل للركيزة في هذا المُركّب، ويستهدف البروتينات لتحللها.
وبالتالي فإن تحديد روابط جديدة لـ Cereblon هو وسيلة للتحكم في العمليات البيولوجية المشاركة في علم الأورام أو الأمراض التنكسية العصبية أو الأمراض الأيضية عن طريق تحفيز التحلل المعتمد على البروتيازوم للبروتينات غير المرغوب فيها.
كيف يعمل؟
مبدأ الفحص
يُعد اختبار ارتباط سيربلون بتقنية HTRF اختبارًا تنافسيًا يستخدم ثاليدوميد-ريد كربيطة لسيربلون، وبروتين سيربلون بشري موسوم بـ GST، وجسمًا مضادًا موسومًا بـ GST كريبتات. يتنافس المركب الخاص بك مع ثاليدوميد-ريد، وبالتالي يمنع حدوث نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET).

بروتوكول الفحص
يمكن إجراء اختبار ارتباط سيربلون في صفيحة بيضاء ذات حجم منخفض (20 ميكرولتر نهائي) مكونة من 96 أو 384 بئرًا. وكما هو موضح هنا، تُوزع العينات أو المعايير مباشرةً في صفيحة الاختبار، ثم يُضاف بروتين سيربلون البشري الموسوم بـ GST، يليه توزيع كواشف HTRF: الجسم المضاد لـ GST الموسوم بكريبتات اليوروبيوم، وثاليدوميد الأحمر الموسوم بـ XL665. يمكن مزج الكواشف الموسومة بفلوروفورات HTRF مسبقًا وإضافتها في خطوة توزيع واحدة. لا حاجة لخطوات غسل. يمكن تصغير البروتوكول أو توسيعه بشكل أكبر ببساطة عن طريق تغيير حجم كل إضافة تناسبياً. تفاعل التطبيق-البروتين-البروتين
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 5 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
اختبار ربط الفئة المستهدفة
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الالتهاب، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل