Revvity، 64BDKRASGPEH، مجموعة ربط HTRF KRAS G12C / GTP، 10000 نقطة اختبار

ملخص
طريقة سريعة وسهلة لتحديد منافسي KRAS G12C/GTP الجدد. KRAS هو بروتين GTPase صغير يشارك في عمليات بيولوجية حيوية، مثل تكاثر الخلايا وبقائها واستقلابها. من المعروف أن هذا الجين الأولي المسرطن يتعرض للطفرات في العديد من أنواع السرطان الفرعية، مما يؤدي إلى تكاثر غير منضبط وتعديلات في استقلاب الخلايا. وبالتالي، يساهم في تأثير واربورغ في الخلايا السرطانية. مثل غالبية بروتينات GTPase الصغيرة، يرتبط KRAS بـ GDP في شكله غير النشط أو يرتبط بـ GTP للتحول إلى الشكل النشط. يُعد KRAS G12C أحد أكثر أشكال الطفرات شيوعًا في السرطان، مما يؤدي إلى حالة نشطة دائمة لـ KRAS. إن تحديد منافسي KRAS/GTP الجدد قبل وضع استراتيجية فعالة للتحكم في العمليات البيولوجية المشاركة في نمو السرطان، عن طريق تقليل نشاط KRAS والمسارات المرتبطة به.
كيف يعمل؟
مبدأ الفحص
يعتمد اختبار ارتباط KRAS بـ GTP بتقنية HTRF على أسلوب الاختبار التنافسي، حيث يستخدم كاشف GTP-Red كربيطة لـ KRAS G12C، وبروتين KRAS G12C بشري موسوم بـ 6His، وجسم مضاد موسوم بـ 6His Cryptate. يتنافس المركب قيد الاختبار مع كاشف GTP Red، وبالتالي يمنع حدوث نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET).

بروتوكول الفحص
يمكن إجراء اختبار ارتباط بروتين KRAS G12C البشري في صفيحة بيضاء ذات حجم منخفض (20 ميكرولتر نهائي) مكونة من 96 أو 384 بئرًا. وكما هو موضح هنا، تُوزع العينات أو المعايير مباشرةً في صفيحة الاختبار. ثم يُضاف بروتين KRAS G12C البشري المُوسوم بـ His، يليه توزيع كواشف HTRF: الجسم المضاد لـ 6His المُوسوم بكريبتات اليوروبيوم وكاشف GTP-Red. يمكن مزج الكواشف المُوسومة بفلوروفورات HTRF مسبقًا وإضافتها في خطوة توزيع واحدة. لا حاجة لخطوات غسل. يمكن تصغير البروتوكول أو توسيعه بشكل أكبر ببساطة عن طريق تغيير حجم كل إضافة تناسبياً. تفاعل البروتين مع التطبيق
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 2 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
اختبار ربط الفئة المستهدفة
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل