Product Description
ملخص
يقيس اختبار CDK2 الخلوي الإجمالي مستوى CDK2 الكلي، ويمكن استخدامه كاختبار معايرة مع مجموعة phospho-CDK2 (Tyr15) الخاصة بنا. تتوافق هذه المجموعة مع المحاليل المنظمة المستخدمة في مجموعة phospho-CDK2، لذا يمكن استخدام نفس المستخلص الخلوي لتحليل كل من البروتينات المفسفرة والبروتينات الكلية.
إنزيم CDK2 (كيناز معتمد على السيكلين 2) هو أحد أفراد عائلة كينازات السيكلين المعتمدة على السيكلين (CDKs) التي تُنسق تقدم دورة الخلية في خلايا الثدييات (بما في ذلك CDK1 وCDK4 وCDK6). يُنشط CDK2 من خلال تفاعله مع السيكلين E والسيكلين A خلال المرحلة G1 المتأخرة والمرحلة S على التوالي، كما يُنظم أيضًا بواسطة موقعين رئيسيين للفسفرة. تُثبط الفسفرة عند Tyr15 بواسطة كيناز Wee1 عملية الفسفرة عن طريق منع ارتباط ATP، بينما يُعد إزالة الفسفرة عند Tyr15 بواسطة الفوسفاتاز Cdc25A والفسفرة عند Thr160 بواسطة كيناز CAK (كيناز مُنشط CDK) ضروريين لنشاطه الكامل.
يُعدّ تثبيط فسفرة CDK2 عند Tyr15 ضروريًا للحفاظ على سلامة الجينوم ومنع تلف الحمض النووي خلال طور S. ولذلك، يُمثّل محور Wee1/Cdc25A هدفًا واعدًا لعلاج السرطان، وقد يُمثّل نهجًا فريدًا لزيادة حساسية الخلايا السرطانية ذات CDK2 المفرط النشاط.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص CDK2 الكلي
يقيس اختبار CDK2 الكلي مستوى التعبير عن CDK2 في مستخلص خلوي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار CDK2 الكلي جسمين مضادين موسومين، أحدهما مرتبط بفلوروفور مانح والآخر بمستقبل. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود CDK2 في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذه المركبات إلى تقريب الفلوروفور المانح من المستقبل، مما يُولد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل.
بروتوكول فحص CDK2 الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن CDK2 HTRF الكلي. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص CDK2 الكلي في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن إجمالي CDK2 باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 2 محلول التحلل 3
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924