Product Description
ملخص
يتيح هذا الفحص القائم على الخلايا بتقنية HTRF الكشف السريع والكمي عن CHK1 المفسفر عند سيرين 345، كقراءة لمسار إشارات ATR/CHK1 عند استجابة تلف الحمض النووي (DDR).
استجابةً لتلف الحمض النووي، مثل انقطاعات السلسلة المفردة (SSBs)، يتم تنشيط مسار ATR-Chk1 واستجابات نقاط التفتيش الخاصة بالتضاعف، مما يؤدي إلى نقاط تفتيش G2/M لإيقاف تقدم دورة الخلية وإتاحة وقت إضافي لإصلاح الحمض النووي. يتم استقطاب ATR لتتبع ssDNA-RPA من خلال شريكه المتفاعل، ATRIP، مما يؤدي إلى فسفرة Chk1 وتنشيطه، وبالتالي تحفيز الإشارات اللاحقة.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص HTRF phospho CHK1 Ser 345
يقيس اختبار Phospho-CHK1 (Ser345) بروتين CHK1 عند فسفرته عند Ser345. وعلى عكس اختبار Western Blot، فإن هذا الاختبار يعتمد كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل.
يستخدم اختبار Phospho-CHK1 (Ser345) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المُفسفر على البروتين، بينما تم اختيار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر الموجود في العينة، مما يُتيح تقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص الفوسفو CHK1 سير 345 ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول اللوحتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل التحلل، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض مكونة من 384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن HTRF لـ Phospho-CHK1 (Ser345).
يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وتماسكها.
بروتوكول فحص الفوسفو CHK1 سير 345 أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن CHK1 المفسفر (Ser345) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل.
يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية التسلسل عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير الحجم مع الحفاظ على جودة عالية لتقنية HTRF. تطبيق - إشارات الخلية
متوافق مع أنظمة التشغيل الآلي - نعم
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924