Product Description
ملخص
يتيح هذا الفحص القائم على الخلايا بتقنية HTRF الكشف السريع والكمي عن CHK2 المفسفر عند الثريونين 68، كقراءة لمسار إشارات ATM/CHK2 عند استجابة تلف الحمض النووي (DDR).
استجابةً لتلف الحمض النووي، مثل انقطاعات السلسلة المزدوجة (DSBs)، يتم تنشيط مسار ATM-Chk2 واستجابات نقطة التفتيش الخاصة بالتضاعف التي تتوسط نقاط التفتيش G1/S لإيقاف تقدم دورة الخلية والسماح بوقت إضافي لإصلاح الحمض النووي.
يؤدي تنشيط ATM إلى فسفرة كيناز نقطة التفتيش Chk2 عند الثريونين 68. Chk2 بروتين مستقر يُعبَّر عنه طوال دورة الخلية، ويبدو أنه غير نشط إلى حد كبير في غياب تلف الحمض النووي. يتضمن تنشيط Chk2 تكوين ثنائي الوحدات والفسفرة الذاتية، ويحفز تنشيط المؤثرات الإشارية اللاحقة مثل بروتين كابت الورم p53 وCdC25C، كما يتحكم في نشاط cdk2/CyclinA.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص HTRF Phospho CHK2 Thr68
يقيس اختبار Phospho-CHK2 (Thr68) بروتين CHK2 عند فسفرته عند Thr68. وعلى عكس اختبار Western Blot، فإن هذا الاختبار يعتمد كلياً على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الرحلان الكهربائي أو النقل.
يستخدم اختبار Phospho-CHK2 (Thr68) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة الفسفورية على البروتين، بينما تم اختيار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر في العينة، مما يُتيح تقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص الفوسفو ثريونين 68-CHK2 ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في طبق 96 بئراً قبل التحلل، ثم نقل المستخلصات إلى طبق كشف منخفض الحجم 384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن Phospho-CHK2 (Thr68) HTRF.
يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وتماسكها.
بروتوكول فحص Phospho-Thr68-CHK2 أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن CHK2 المفسفر (Thr68) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحلل. لا حاجة لخطوات غسل.
يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية التسلسل عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير الحجم مع الحفاظ على جودة عالية لتقنية HTRF. تطبيق - إشارات الخلية
متوافق مع أنظمة التشغيل الآلي - نعم
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1 محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924