Product Description
ملخص
يقيس اختبار Cereblon الخلوي الكلي مستوى التعبير عن إنزيم E3 ubiquitin ligase Cereblon (CRBN) في الخلايا.
Cereblon هو بروتين معبر عنه في كل مكان ويعمل كوحدة فرعية للتعرف على الركيزة داخل مركب CRL4-CRBN E3 ubiquitin ligase، ويستهدف بروتينات محددة للتحلل البروتيني من خلال نظام Ubiquitin Proteasome (UPS).
يلعب بروتين سيربلون دورًا رئيسيًا في النمو الطبيعي للأطراف، وتكاثر الخلايا الطبيعي، والتمثيل الغذائي، وفي الذاكرة والتعلم.
يُعدّ بروتين سيربلون الهدف المباشر الرئيسي للأدوية المُعدِّلة للمناعة (IMiDs) مثل ثاليدوميد، وبوماليدوميد، وليناليدوميد، وهي جميعها أدوية معتمدة من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية لعلاج الورم النخاعي المتعدد. ومن المثير للاهتمام، أنه تم مؤخرًا تحويل هذه الأدوية إلى جزيئات PROTAC لتوجيه عملية تحلل البروتينات غير المرغوب فيها بواسطة نظام البروتياز اليوبيكويتين (UPS).
كيف يعمل؟
مبدأ فحص السيربلون الكلي
يقيس اختبار سيربلون الكلي مستوى التعبير عن بروتين سيربلون في مستخلص خلوي. على عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار سيربلون الكلي جسمين مضادين موسومين، أحدهما مرتبط بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. عند وجود سيربلون في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذه المركبات إلى تقريب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، مما يُولد إشارة نقل طاقة رنين فلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول اختبار Cereblon ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف Total Cereblon HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول اختبار Cereblon الكامل في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن بروتين سيربلون الكلي باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الالتهاب، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924