Product Description
ملخص
يكشف اختبار HTRF Total CREBBP الخلوي عن مستويات بروتين CREBBP الكلي داخل الخلايا بسهولة ودقة. تتوافق هذه المجموعة مع المحاليل المستخدمة في مجموعة Total p300، مما يسمح باستخدام نفس المستخلص الخلوي لتحليل كلا البروتينين.
يُعدّ كلٌّ من CREBBP (بروتين ربط CREB، المعروف أيضًا باسم CBP أو KAT3A) ونظيره p300 (المعروف أيضًا باسم EP300 أو KAT3B) من المُنشِّطات المُشاركة الرئيسية لعملية النسخ. تُشكّل هذه الإنزيمات الناقلة لمجموعة الأسيتيل من الليسين (KATs) عائلة KAT3 الثنائية. وهي تُنظّم عملية نسخ الجينات من خلال تسهيل تجميع آليات النسخ، ومن خلال أسيتلة بقايا الليسين المُحدّدة على الهستونات الأساسية وعلى مُنظِّمات النسخ المُشاركة. يعمل كلٌّ من CREBBP وp300 كمركزين محوريين في الشبكة، حيث تُنظّم أكثر من 400 بروتين التعبير الجيني، والتي بدورها تُنظّم العديد من العمليات الخلوية الأساسية، مثل التكاثر والتوازن الخلوي.
تؤدي الطفرات أو الانتقالات الكروموسومية التي تشمل بروتين CREBBP/p300 إلى خلل في تنظيم الجينات، وقد ينتج عنها مجموعة متنوعة من الأمراض البشرية مثل السرطان، والأمراض التنكسية العصبية، والأمراض الالتهابية. وقد طُوِّرت مؤخرًا مثبطات بروتين CREBBP/p300 PROTAC لعلاج أنواع السرطان لدى البشر.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص CREBBP الكلي
يقيس اختبار HTRF Total CREBBP مستوى التعبير عن بروتين CREBBP في مستخلص الخلية. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح، ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Total CREBBP جسمين مضادين موسومين، أحدهما مرتبط بفلوروفور مانح، والآخر بفلوروفور مستقبل. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود CREBBP في مستخلص الخلية، يؤدي إضافة هذه المركبات إلى تقريب الفلوروفور المانح من المستقبل، مما يُولد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول فحص CREBBP الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين CREBBP الكلي بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص CREBBP الكامل في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن إجمالي بروتين CREBBP باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924