Product Description
ملخص
تُعدّ مجموعة phospho-CREB (S133) مثاليةً للكشف الكمّي عن بروتين ربط عنصر الاستجابة لـ cAMP عند فسفرته في الموقع S133، مما يُتيح التحقق من حالة فسفرة CREB مقارنةً بمستواه في حالة الاستقرار داخل الخلايا. يعمل CREB كعامل نسخ، حيث يُرسل إشاراتٍ من مسار MAPK/ERK ويتم تنشيطه عبر مساراتٍ متعددة، مثل MAPK/ERK وPI3K/AKT وإشارات الاستجابة للضغط. يلعب CREB دورًا حاسمًا في تعزيز اللدونة العصبية، والقدرات الإدراكية، وتكاثر الخلايا، وبقائها، واستتباب الجلوكوز.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفور-CREB (S133)
يقيس اختبار فوسفو-CREB (S133) بروتين CREB عند فسفرته عند الموقع S133. وعلى عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار فوسفو-CREB (S133) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة المفسفرة على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتينات في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص فوسفو-CREB (S133) ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين CREB الفوسفوري (S133) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص فوسفو-CREB (S133) أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن CREB المُفسفر (S133) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1 محلول التحلل 3
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924