Product Description
ملخص
يوفر اختبار السيكلين B1 الكلي القائم على الخلايا طريقةً سهلةً ودقيقةً للكشف عن مستويات السيكلين B1 الكلية داخل الخلايا. تتوافق هذه المجموعة مع المحاليل المنظمة من مجموعة السيكلين B1 المفسفر (Ser126)، لذا يمكن استخدام نفس المستخلص لتحليل كلٍّ من البروتينات المفسفرة والبروتينات الكلية.
تُعدّ بروتينات عائلة السيكلين B (بما في ذلك السيكلين B1 والسيكلين B2) من المنظمات المهمة لتقدم دورة الخلية. وهي وسائط أساسية للانتقال المعتمد على عوامل النمو من طور G2 إلى طور الانقسام المتساوي، حيث تلعب دور الوحدة التنظيمية لـ CDK1.
يتم تنظيم السيكلين B1 بشكل تصاعدي في وجود المحفزات الميتوجينية خارج الخلية، ثم يتم تنظيمه بشكل تنازلي سريع عن طريق التحلل البروتيني بعد فسفرته على Ser126.
غالباً ما يُفرط في التعبير عن بروتين سيكلين B1 في العديد من أنواع السرطان. ويؤدي هذا الإفراط غير الطبيعي في التعبير إلى خلل في تنظيم نشاط CDK1، مما قد يُفضي إلى تكوّن الأورام.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص السيكلين B1 الكلي
يقيس اختبار السيكلين B1 الكلي مستوى التعبير عن السيكلين B1 في مستخلص خلوي. على عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار السيكلين B1 الكلي جسمين مضادين موسومين، أحدهما مرتبط بفلوروفور مانح والآخر بمستقبل. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود السيكلين B1 في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذه المركبات إلى تقريب الفلوروفور المانح من المستقبل، مما يُولد إشارة نقل طاقة رنين فلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل.
بروتوكول فحص السيكلين B1 الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن السيكلين B1 الكلي بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص السيكلين B1 الكلي في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن إجمالي السيكلين B1 باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924