Product Description
ملخص
يكشف هذا الفحص الخلوي بتقنية HTRF بسهولة ودقة عن السيكلين D1 المفسفر عند الثريونين 286.
تُعدّ بروتينات عائلة السيكلين D (بما في ذلك السيكلين D1، والسيكلين D2، والسيكلين D3) من المنظمات المهمة لتقدم دورة الخلية. وهي وسائط أساسية في انتقال الخلية من طور G1 إلى طور S، وذلك من خلال دورها كمنظمات غير مباشرة لـ CDK4/6، اعتمادًا على عوامل النمو.
يتم تنظيم السيكلين D1 بشكل تصاعدي في وجود محفزات الانقسام الخلوي خارج الخلية، ثم يتم تنظيمه بشكل تنازلي سريع عن طريق التحلل البروتيني بعد فسفرته على Thr286 بواسطة كيناز GSK-3β.
يُعدّ السيكلين D1 جينًا ورميًا، ويؤدي فرط التعبير عنه إلى خلل في تنظيم نشاط CDK4/6، مما يُفضي إلى تكوّن الأورام. قد ينتج فرط التعبير عن السيكلين D1 عن تضخيم الجين أو إعادة ترتيب الكروموسومات، أو نتيجةً لضعف تحلل البروتين. وقد تم الإبلاغ عن طفرات وحذف تؤثر على فسفرته على الثريونين 286 في العديد من أنواع السرطان البشري.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفوسايكلين D1 (Thr286)
يقيس اختبار فوسفو-سايكلين D1 (Thr286) مستوى السايكلين D1 عند فسفرته عند الموقع Thr286. وعلى عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار فوسفو-سايكلين D1 (Thr286) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما تم اختيار الجسم المضاد الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين معقد مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص الفوسفوسايكلين D1 (Thr286) ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم صغير قبل إضافة كواشف الكشف عن فوسفو-سايكلين D1 (Thr286) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص الفوسفوسايكلين D1 (Thr286) في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن السيكلين D1 المُفسفر (Thr 286) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والمعالجة والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
متوافق مع أنظمة التشغيل الآلي - نعم
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1 محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924