Product Description
ملخص
يوفر هذا التحليل الخلوي بتقنية HTRF طريقةً سهلةً ودقيقةً للكشف عن بروتين DAP12 المُفسفر عند الموقع Tyr91. يُعرف بروتين DAP12 (بروتين تنشيط DNAX-12)، أو TYROBP (بروتين ربط كيناز التيروزين TYRO)، بأنه بروتين مُهايئ للإشارات عبر الغشاء، ويلعب دورًا محوريًا في الاستجابات المناعية الفطرية والالتهاب العصبي. يُعبر عن DAP12 على نطاق واسع في مختلف الخلايا المناعية، بما في ذلك الخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا الوحيدة، والبلعميات، والخلايا الدبقية الصغيرة، وهي الخلايا المناعية المقيمة في الجهاز العصبي المركزي. في سياق الالتهاب العصبي، يكتسب DAP12 أهميةً خاصةً لارتباطه بمستقبل TREM2 (مستقبل التحفيز المُعبر عنه على الخلايا النخاعية 2). يُعد محور إشارات DAP12-TREM2 مُنظمًا رئيسيًا لوظيفة الخلايا الدبقية الصغيرة، حيث يؤثر على عمليات مثل البلعمة، والاستجابات الالتهابية، واستقلاب الدهون. من خلال تمكين الكشف عن DAP12 المفسفر عند Tyr91، يوفر هذا الاختبار للباحثين أداة قيمة للتحقيق في تنشيط الخلايا الدبقية الصغيرة، والعمليات الالتهابية العصبية، والآثار المحتملة للتدخلات العلاجية التي تستهدف مسار DAP12-TREM2.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-DAP12 (Tyr91)
يقيس اختبار Phospho-DAP12 (Tyr91) بروتين DAP12 عند فسفرته عند الموقع Tyr91. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم الاختبار جسمين مضادين، أحدهما موسوم بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما تم اختيار الجسم المضاد الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته.
يُمكّن فسفرة البروتين من تكوين معقد مناعي يشمل كلاً من الأجسام المضادة الموسومة، والذي يجعل الفلوروفور المانح على مقربة من المستقبل، مما يؤدي إلى توليد إشارة FRET.
تتناسب شدتها بشكل مباشر مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة وتوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في شكل اختبار بدون غسل.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-DAP12 (Tyr91)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن الفوسفور-DAP12 (Tyr91) بتقنية HTRF. يسمح هذا البروتوكول بمراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص Phospho-DAP12 (Tyr91) أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن بروتين DAP12 المُفسفر (Tyr91) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يسمح هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) بتصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 3
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الهدف-DAP12
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي - الجهاز العصبي المركزي
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924