Product Description
ملخص
يُتيح هذا التحليل الخلوي بتقنية HTRF قياس كمية FAK المُفسفر عند Tyr397 (المتبقي في الإنسان والفأر والدجاج، المُكافئ لـ Y428 في الفأر) بسهولة ودقة. FAK، أو كيناز الالتصاق البؤري، هو كيناز تيروسين سيتوبلازمي يُنظم التصاق الخلايا وهجرتها وتكاثرها وبقائها. يُعد FAK مُنظمًا رئيسيًا لإشارات ECM/integrin وcadherin، ويلعب دورًا في التصاق الخلايا، والوصلات الخلوية، والهجرة، والبقاء، والاستشعار الميكانيكي. يُمكن تنشيط FAK بواسطة مُستقبلات عوامل النمو، ومُستقبلات السيتوكينات، ومُستقبلات البروتين G المقترنة (GPCRs). يرتبط ازدياد التعبير عن FAK وفسفرته بزيادة التصاق الخلايا السرطانية وهجرتها وغزوها في العديد من أنواع السرطان، وبهجرة الخلايا الليفية على الفيبرونيكتين في تليف الأنسجة.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-FAK (Tyr397)
يقيس اختبار Phospho-FAK (Tyr397) بروتين FAK (كيناز الالتصاق البؤري) عند فسفرته عند الموقع Tyr397. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Phospho-FAK (Tyr397) جسمين مضادين موسومين، أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة المفسفرة على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-FAK (Tyr397)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين فوسفو-FAK (Tyr397) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص Phospho-FAK (Tyr397) أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن بروتين FAK المُفسفر (Tyr397) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 2 محلول التحلل 3
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: أمراض القلب والأوعية الدموية، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924