Product Description
ملخص
يرصد اختبار الكشف عن فسفرة التيروزين 589/591 لبروتين FLT3 البشري (كيناز التيروزين الشبيه بـ Fms-3)، والمعروف أيضًا باسم FLK2، فسفرة بروتين FLT3 من النوع البري (FLT3 WT) و/أو طفرة التكرار الترادفي الداخلي (ITD) لبروتين FLT3 عند التيروزين 589/591 في خلايا مختلفة. يُعد FLT3 كيناز تيروزين مستقبل من الفئة الثالثة، يُعبَّر عنه في الخلايا المناعية، ويتم تنشيطه بواسطة الرابط الخاص به، FLT3L. بعد ارتباط FLT3L، يتحد مستقبل FLT3 مع مستقبلات أخرى، مما يُنشِّط مسارات متعددة، بما في ذلك مسار فوسفاتيديل إينوزيتول 3-كيناز (PI3K) ومسار MAPK، ما يؤدي إلى انقسام الخلايا المناعية وتكاثرها وبقائها. قد يؤدي خلل تنظيم مسارات FLT3 إلى تكاثر غير منتظم، وخلايا مناعية غير ناضجة، وظهور أنماط ظاهرية سرطانية. يُعدّ جين FLT3 الجين الأكثر عرضةً للطفرات في ابيضاض الدم النخاعي الحاد (AML). تؤدي الطفرات في جين FLT3 إلى تنشيط مستمر لنشاط كيناز المستقبل، أو تعطيل نشاط التثبيط الذاتي للمستقبل. وتُعرف طفرة ITD في جين FLT3 بتأثيرها الكبير في ابيضاض الدم النخاعي الحاد. ولذلك، أصبحت طفرات FLT3 أهدافًا دوائيةً مهمةً في صناعة الأدوية.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص Phospho-FLT3 (Tyr 589/591)
يقيس اختبار Phospho-FLT3 (Tyr 589/591) مستوى FLT3 عند فسفرته عند التيروسين 589 و591. وعلى عكس اختبار Western Blot، فإن هذا الاختبار يعتمد كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل.
يستخدم اختبار Phospho-FLT3 (Tyr 589/591) جسمين مضادين، أحدهما مُوسَم بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة فلورية مستقبلة. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة الفسفورية على البروتين، بينما تم اختيار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر في العينة، مما يُتيح تقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-FLT3 (Tyr 589/591)
يتضمن بروتوكول اللوحتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل التحلل، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض مكونة من 384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف Phospho-FLT3 Tyr589/591 HTRF.
يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وتماسكها.
بروتوكول فحص Phospho-FLT3 (Tyr 589/591) أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن بروتين Phospho-FLT3 Tyr589/591 باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. ولا تتطلب العملية أي خطوات غسل.
يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير الحجم مع الحفاظ على جودة عالية لتقنية HTRF. تطبيق - إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924