Product Description
ملخص
صُمم هذا الاختبار لقياس مستوى التعبير الداخلي لإنزيم GAPDH في الخلايا والأنسجة، وذلك لتطبيع البيانات المُستقاة من البروتينات المُفسفرة و/أو البروتينات الكلية محل الاهتمام. يُعد إنزيم جليسرالدهيد-3-فوسفات ديهيدروجينيز (GAPDH) إنزيمًا رئيسيًا في عملية تحلل الجلوكوز، ويُعبر عنه بشكل دائم ومستقر في جميع الخلايا والأنسجة. يتميز تسلسل الأحماض الأمينية الخاص به بدرجة عالية من التشابه بين أنواع الثدييات. هذه الخصائص تجعله أحد أكثر البروتينات المرجعية استخدامًا. يتناسب تركيزه طرديًا مع عدد الخلايا وتركيز البروتين الكلي، ولذلك يُستخدم كعنصر تحكم داخلي لتطبيع البيانات، لتصحيح تغيرات الإشارة الناتجة عن التباين التجريبي (مثل عدد الخلايا المتبقية في طبق الزرع بعد المعالجة، أو فعالية التحلل). إن حجم العينة المنخفض البالغ 4 ميكرولتر وتوافقه مع جميع محاليل تحلل البروتين الكلي الفوسفوري HTRF يتيح إجراء تحليل متعدد المعايير من نفس المحلول، مع الكشف عن GAPDH بالتوازي مع البروتين (البروتينات) الفوسفوري و/أو البروتين الكلي محل الاهتمام.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص GAPDH الأساسي
يقيس اختبار GAPDH Housekeeping مستوى GAPDH الداخلي في مستخلص خلوي أو نسيجي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار GAPDH Housekeeping جسمين مضادين موسومين: أحدهما مرتبط بصبغة فلورية مانحة، والآخر بصبغة مستقبلة. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود GAPDH في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذه المركبات إلى تقريب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، مما يُولد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، وتوفر وسيلة لتقييم أي تغييرات ناتجة عن التباين التجريبي في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص GAPDH الأساسي ثنائي الألواح
يُجرى هذا التحليل وفقًا لبروتوكول التحليل ثنائي الألواح، حيث تُزرع الخلايا وتُعالج في طبق زراعة. في خطوة الكشف، يُنقل 4 ميكرولتر من المستخلص الخلوي إلى صفيحة بيضاء ذات حجم منخفض مكونة من 96 أو 384 بئرًا، ويُضاف 12 ميكرولتر من مخفف المجموعة قبل إضافة 4 ميكرولتر من كواشف HTRF®. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها في طبق زراعة الخلايا المناسب. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924