مجموعة Revvity، 64HIFPEH، HTRF للكشف عن HIF-1α البشري والفأري، 10000 نقطة اختبار

ملخص
يُعدّ HIF-1α أحد الوحدتين الفرعيتين لعامل النسخ المُحفَّز بنقص الأكسجين-1 (HIF-1). يعمل HIF-1 كمنظم رئيسي للاستجابة الخلوية والجهازية لنقص الأكسجين، وذلك بتنشيط ترجمة الجينات المشاركة في استقلاب الطاقة، وتكوين الأوعية الدموية، والاستماتة الخلوية، وغيرها. وقد ارتبطت المستويات العالية من HIF-1 بتطور الأورام العدوانية. كما يرتبط HIF-1α ارتباطًا وثيقًا بداء السكري من خلال دوره في امتصاص الجلوكوز من قِبَل الخلايا المستهدفة. وقد ثبت أيضًا تورطه في مضاعفات داء السكري، مثل اعتلال الكلى السكري أو التئام جروح مرضى السكري.
كيف يعمل؟
مبدأ الفحص
يُعدّ اختبار HIF-1α HTRF اختبارًا مناعيًا ساندويتشيًا يستخدم نوعين من الأجسام المضادة البشرية النوعية لـ HIF-1α، مُوسومة على التوالي بـ Europium Cryptate (المانح) و d2 (المستقبل). تتناسب شدة الإشارة طرديًا مع تركيز الأجسام المضادة لـ HIF-1α الموجودة في العينة. يمكن مزج كواشف الكشف مسبقًا وإضافتها في خطوة واحدة للكشف المباشر. لا حاجة للغسل في أي مرحلة. بعد تحلل الخلايا، يمكن الكشف عن HIF-1α باستخدام كواشف مجموعة اختبار HTRF HIF-1α الخلوية ومعظم أجهزة قراءة الألواح متعددة الأنماط بتقنية TR-FRET.

بروتوكول الفحص
بروتوكول فحص ثنائي الصفائح: تُزرع الخلايا وتُحفز وتُحلل في نفس صفيحة زراعة ذات 96 بئرًا. ثم تُنقل المستخلصات إلى صفيحة الفحص للكشف عن HIF-1α باستخدام كواشف HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها. يمكن مزج الأجسام المضادة الموسومة بفلوروفورات HTRF مسبقًا وإضافتها في خطوة توزيع واحدة لتبسيط إجراء الفحص. يمكن إجراء الكشف في صفائح ذات 96 إلى 384 بئرًا ببساطة عن طريق تغيير حجم كل إضافة تناسبيًا. التطبيق: قياس كمية البروتين
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الفئة المستهدفة - المؤشرات الحيوية
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل