Product Description
ملخص
يوفر اختبار IDO1 الكلي القائم على الخلايا طريقة ملائمة ودقيقة للكشف عن مستويات IDO1 الكلية داخل الخلايا.
يُعدّ إنزيم IDO1 (إندولامين 2،3 ديوكسيجيناز 1) الإنزيمَ المُحدِّدَ لمعدل التفاعل في مسار الكينورينين، وذلك لقدرته على تحفيز تحلل التربتوفان (Trp) إلى مستقلبات الكينورينين (Kyn). يُعزِّز استنفاد التربتوفان وإنتاج الكينورينين تثبيط المناعة عن طريق تثبيط الخلايا التائية الفعالة CD8+ والخلايا القاتلة الطبيعية (NK). كما يزيد من نشاط الخلايا التائية التنظيمية CD4+ والخلايا الكابتة المشتقة من النخاع (MDSCs). ويلعب إنزيم IDO1 أيضًا دورًا محوريًا في تعزيز نمو الأوعية الدموية الجديدة (تكوين الأوعية).
يتم التعبير عن IDO1 بشكل مفرط في خلايا الورم المختلفة ويتسلل إلى الخلايا المناعية، مما يؤدي إلى هروب الورم من الجهاز المناعي وتكوين الأوعية الدموية الجديدة.
على الرغم من تطوير مثبطات إنزيم IDO1 لتثبيط استقلاب التربتوفان، إلا أن هذه العلاجات لم تحقق نجاحًا يُذكر في إطالة أمد بقاء المرضى على قيد الحياة. وقد اتجهت الجهود مؤخرًا نحو استهداف تحلل بروتين IDO1 (TPD) كاستراتيجية علاجية أكثر فعالية.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص إجمالي إنزيم IDO1
يقيس اختبار IDO1 الكلي مستوى التعبير عن إنزيم IDO1 في مستخلص خلوي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح، ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار IDO1 الكلي جسمين مضادين موسومين، أحدهما مرتبط بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود إنزيم IDO1 في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذه المركبات إلى تقريب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، مما يُولد إشارة نقل طاقة رنين فلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول فحص IDO1 الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن إنزيم IDO1 الكلي بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص IDO1 الكلي في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن إجمالي إنزيم IDO1 باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924