Product Description
ملخص
إنزيم IRE1 (إنزيم 1 ألفا المُتطلب للإينوزيتول) هو كيناز سيرين/ثريونين يعمل كأحد الفروع الثلاثة لمسار إشارات استجابة البروتين غير المطوي (UPR)، وله أدوار في تنظيم إجهاد الشبكة الإندوبلازمية واستجابة البروتين غير المطوي. يُشفّر إنزيم IRE1 بواسطة جين ERN1 ويُعبّر عنه بشكل واسع في الثدييات. وهو بروتين غشائي من النوع الأول، يمتلك نطاقًا في تجويف الشبكة الإندوبلازمية يستشعر حالة طي البروتين، ونطاقًا سيتوبلازميًا يحتوي على كيناز محفز وريبونوكلياز. في السنوات الأخيرة، برز إنزيم IRE1 كهدف علاجي مهم في العديد من الأمراض، بما في ذلك الاضطرابات التنكسية، والأمراض الالتهابية والاستقلابية، والسرطان.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص Phospho-IRE1 (Ser724)
يقيس اختبار Phospho-IRE1 (Ser724) بروتين DDR1 عند فسفرته عند الموقع Ser724. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم الاختبار جسمين مضادين، أحدهما موسوم بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة فلورية مستقبلة. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة الفسفورية على البروتين، بينما تم اختيار الجسم المضاد الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، وبالتالي يُولّد إشارة FRET.
تتناسب شدتها بشكل مباشر مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة وتوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في شكل اختبار بدون غسل.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-IRE1 (Ser724)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين فوسفو-IRE1 (Ser724) بتقنية HTRF. يسمح هذا البروتوكول بمراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص أحادي اللوحة لـ Phospho-IRE1 (Ser724)
يمكن الكشف عن IRE1 المُفسفر (Ser724) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يسمح هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) بتصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الهدف-IRE1
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: التهاب الجهاز العصبي المركزي والأورام
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924