Product Description
ملخص
إن مثبط الوحدة الفرعية ألفا لكيناز عامل النسخ النووي كابا-بي (IKKα)، المعروف أيضًا باسم IKK1، هو كيناز بروتيني مشفر بواسطة جين CHUK البشري. يُعد IKKα جزءًا من مركب كيناز IκB (IKK) الذي يتكون من الوحدات الفرعية المحفزة IKKα و IKKβ والوحدة الفرعية التنظيمية NF-κB essential modulator (NEMO، IKKγ).
يعتمد تنشيط مُركّب IKK على فسفرة IKKβ (Ser177/180) أو IKKα (Ser176/Ser 180)، مما يُؤدي إلى تغيير بنيوي مُعقّد وتنشيط الكيناز. يُعدّ IKKα مُنظِّمًا رئيسيًا لمسار NF-κB، وهو مسارٌ يقع أسفل العديد من العوامل المُحفِّزة للالتهاب، بما في ذلك إنترلوكين-1، وعامل نخر الورم ألفا (TNFα)، ومُنشِّطات مُستقبلات تول-لايك. على الرغم من التشابه الكبير بين IKKα وIKKβ، حيث يتشاركان في أكثر من 50% من التشابه البنيوي، إلا أنهما يمتلكان ركائز مختلفة في مسار الإشارة، ووظائف غير مُتداخلة.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-IKKα (Ser176/180)
يقيس اختبار Phospho-IKKα (Ser176/180) بروتين IKKα عند فسفرته عند الموقعين Ser176 وSer180. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Phospho-IKKα (Ser176/180) جسمين مضادين، أحدهما موسوم بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما تم اختيار الجسم المضاد الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدتها بشكل مباشر مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، وتوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في شكل اختبار بدون غسل.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-IKKα (Ser176/180
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن فوسفو-IKKα (Ser176/180) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص أحادي اللوحة لـ Phospho-IKKα (Ser176/180
يمكن الكشف عن IKKα المفسفر (Ser176/180) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924