Product Description
ملخص
طريقة سريعة وسهلة لتحديد مثبطات جديدة لتفاعلات بروتين KRAS G12C/SOS1. يُعد KRAS بروتين GTPase صغيرًا يشارك في عمليات بيولوجية حيوية، مثل تكاثر الخلايا وبقائها واستقلابها. من المعروف أن هذا الجين الأولي المسرطن يتعرض للطفرات في العديد من الأنواع الفرعية للسرطان، مما يؤدي إلى تكاثر غير منضبط وتعديلات في استقلاب الخلايا. وبالتالي، يُساهم في تأثير واربورغ في الخلايا السرطانية. وكما هو الحال مع غالبية بروتينات GTPase الصغيرة، يرتبط KRAS بـ GDP في حالته غير النشطة، أو يرتبط بـ GTP للتحول إلى حالته النشطة. يُعد KRAS G12C أحد أكثر أشكال الطفرات شيوعًا في السرطان، مما يؤدي إلى حالة نشطة دائمة لـ KRAS. عامل تبادل النيوكليوتيدات الغوانينية لـ Ras، والذي يُسمى أيضًا SOS1، هو بروتين GEF يُعزز الشكل النشط لـ KRAS. يؤدي ارتفاع مستوى تفاعل KRAS/SOS1 إلى ظهور أنماط ظاهرية سرطانية. إن استخدام مثبطات KRAS/SOS1 الجديدة أو منافسي GTP يقلل من العمليات البيولوجية الرئيسية المشاركة في نمو السرطان، وذلك عن طريق تقليل نشاط KRAS بالإضافة إلى المسارات المرتبطة به.
كيف يعمل؟
مبدأ الفحص
يتضمن اختبار تفاعل البروتين-بروتين KRAS G12C / SOS1 شركاء بشريين مُعاد تركيبهم مُوسَمين (KRAS G12C وSOS1) وكواشف مضادة للوسم مُوسَمة للكشف بتقنية HTRF. في غياب أي مُثبِّط، يرتبط KRAS G12C المُحمَّل بـ GTP بـ SOS1، ويُولِّد ارتباط كل كاشف كشف بهدفه المُوسَم إشارة HTRF. في وجود مُثبِّطات KRAS G12C / SOS1 أو مُنافسات GTP، تنخفض إشارة HTRF.
بروتوكول الفحص
يمكن إجراء اختبار ارتباط بروتين KRAS G12C البشري ببروتين SOS1 في صفيحة بيضاء ذات حجم منخفض (20 ميكرولتر نهائي) مكونة من 96 أو 384 بئرًا. وكما هو موضح هنا، تُضاف المركبات أو المعايير مباشرةً إلى صفيحة الاختبار. ثم يُضاف مزيج GTP وبروتين Tag1-KRAS G12C البشري، بالإضافة إلى بروتين Tag2-SOS1 البشري، متبوعًا بإضافة كواشف HTRF: الجسم المضاد لـ Tag2 الموسوم بكريبتات التيربيوم، والجسم المضاد لـ Tag1 الموسوم بـ XL665. يمكن مزج الكواشف الموسومة بفلوروفورات HTRF مسبقًا وإضافتها في خطوة واحدة. لا حاجة لخطوات غسل. يمكن تصغير البروتوكول أو توسيعه بشكل أكبر ببساطة عن طريق تغيير حجم كل إضافة تناسبياً. تفاعل التطبيق مع البروتين.
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 2 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
اختبار ربط الفئة المستهدفة
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924