Product Description
ملخص
طريقة سريعة وسهلة لتحديد مثبطات جديدة لتفاعلات بروتين KRAS WT / SOS1. يُعد KRAS بروتين GTPase صغيرًا يشارك في العديد من العمليات البيولوجية، مثل تكاثر الخلايا وبقائها واستقلابها. من المعروف أن هذا الجين الأولي المسرطن يتعرض للطفرات في العديد من الأنواع الفرعية للسرطان، مما يؤدي إلى تكاثر غير منضبط وتعديلات في استقلاب الخلايا. وبالتالي، يُساهم في تأثير واربورغ في الخلايا السرطانية. وكما هو الحال مع غالبية بروتينات GTPase الصغيرة، يرتبط KRAS بـ GDP في شكله غير النشط، أو يرتبط بـ GTP للتحول إلى الشكل النشط. يُعد KRAS G12C أحد أكثر أشكال الطفرات شيوعًا في السرطان، مما يؤدي إلى حالة نشطة دائمة لـ KRAS. عامل تبادل النيوكليوتيدات الغوانينية Ras، والذي يُسمى أيضًا SOS1، هو بروتين GEF يُعزز الشكل النشط لـ KRAS. يؤدي ارتفاع مستوى تفاعل KRAS / SOS1 إلى ظهور الأنماط الظاهرية السرطانية.
كيف يعمل؟
مبدأ الفحص
يتضمن اختبار تفاعل البروتين-بروتين KRAS WT/SOS1 شركاء بشريين مُعاد تركيبهم مُوسَمين (KRAS WT وSOS1) وكواشف مضادة للوسم مُوسَمة للكشف بتقنية HTRF. في غياب المُثبِّط، يرتبط KRAS WT المُحمَّل بـ GTP بـ SOS1، ويُولِّد ارتباط كل كاشف كشف بهدفه المُوسَم إشارة HTRF. في وجود مُثبِّطات KRAS WT/SOS1 أو مُنافسات GTP، تنخفض إشارة HTRF.
بروتوكول الفحص
يمكن إجراء اختبار ارتباط بروتين KRAS WT/SOS1 البشري في صفيحة بيضاء ذات حجم منخفض (20 ميكرولتر نهائي) مكونة من 96 أو 384 بئرًا. وكما هو موضح هنا، تُوزع المركبات أو المعايير مباشرةً في صفيحة الاختبار، ثم يُضاف مزيج GTP وبروتين Tag1-KRAS WT البشري المُجهز مسبقًا مع بروتين Tag2-SOS1 البشري، يليه توزيع كواشف HTRF: الجسم المضاد لـ Tag2 الموسوم بكريبتات التيربيوم، والجسم المضاد لـ Tag1 الموسوم بـ XL665. يمكن مزج الكواشف الموسومة بفلوروفورات HTRF مسبقًا وإضافتها في خطوة توزيع واحدة. لا حاجة لخطوات غسل. يمكن تصغير البروتوكول أو توسيعه بشكل أكبر ببساطة عن طريق تغيير حجم كل إضافة تناسبياً. تفاعل التطبيق-البروتين-البروتين
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 2 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
اختبار ربط الفئة المستهدفة
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924