Product Description
ملخص
يُعدّ LC3 نظيراً ثديياً لبروتين ATG8 الموجود في الخميرة، ويتوزع في جميع أنسجة الثدييات والخلايا المزروعة. ويُعتبر LC3 عنصراً أساسياً في عملية الالتهام الذاتي، وهي عملية تحلل تحافظ على التوازن الخلوي.
أثناء عملية الالتهام الذاتي، تُبتلع المكونات السيتوبلازمية، مثل البروتينات السيتوبلازمية والعضيات، بواسطة الجسيمات الالتهامية الذاتية. في الوقت نفسه، يرتبط شكل سيتوبلازمي من LC3 (LC3-I) بالفوسفاتيديل إيثانولامين لتكوين مركب LC3-فوسفاتيديل إيثانولامين (LC3-II). يُستقطب هذا المركب المتكون حديثًا إلى أغشية الجسيمات الالتهامية الذاتية. يؤدي اندماج الجسيمات الالتهامية الذاتية مع الليزوزومات لاحقًا إلى تكوين الجسيمات الالتهامية الذاتية الليزوزومية، حيث تُحلل المكونات داخل الجسيمات الالتهامية الذاتية بواسطة الهيدرولازات الليزوزومية. في الوقت نفسه، يتحلل LC3-II داخل تجويف الجسيمات الالتهامية الذاتية الليزوزومية.
وقد تبين أن مستوى LC3-II يتناسب مع وفرة الأوتوفاجوسوم مما يجعل LC3-II المؤشر الأكثر شيوعًا للالتهام الذاتي.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص LC3B-II
يقيس اختبار HTRF LC3B-II مستوى التعبير عن بروتين LC3B-II في مستخلص خلوي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح، ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار LC3B-II جسمين مضادين موسومين، أحدهما مرتبط بفلوروفور مانح، والآخر بفلوروفور مستقبل. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود LC3B-II في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذين المركبين إلى تقريب الفلوروفور المانح من المستقبل، مما يُولد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول فحص LC3B-II ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف LC3B-II HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص LC3B-II أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن LC3B-II باستخدام كواشف HTRF في صفيحة واحدة تُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية HTS من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: قياس كمية البروتين
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
الفئة المستهدفة - المؤشرات الحيوية
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924