Product Description
ملخص
يُتيح هذا التحليل الخلوي بتقنية HTRF قياس كمية MKK4 المُفسفر (كيناز البروتين المنشط بالميتوجين 4) عند الموقع Ser257 بدقة وسهولة. يتم تحفيز فسفرة MKK4 على الموقع Ser257 بواسطة كينازات MKK المختلفة، مثل TAK1 وTpl2 وASK1، استجابةً للضغوط الخلوية والسيتوكينات الالتهابية. وبمجرد فسفرته، يُحفز MKK4 بشكل أساسي تنشيط JNK، الذي يُنظم مجموعة من العمليات البيولوجية المتورطة في تكوين الأورام، والاضطرابات التنكسية العصبية، والتليف.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-MKK4 (Ser257)
يقيس اختبار Phospho-MKK4 (Ser257) بروتين MKK4 عند فسفرته عند الموقع Ser257. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم الاختبار جسمين مضادين، أحدهما موسوم بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الصبغة الفلورية المانحة من المستقبلة، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-MKK4 (Ser257)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن فوسفو-MKK4 (Ser257) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص أحادي اللوحة لـ Phospho-MKK4 (Ser257)
يمكن الكشف عن MKK4 المفسفر (Ser257) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924