Product Description
ملخص
يكشف هذا الفحص الخلوي القائم على تقنية HTRF بسهولة ودقة عن MLKL المفسفر عند Ser358.
يُعدّ بروتين MLKL (بروتين يشبه نطاق كيناز السلالة المختلطة) وسيطًا رئيسيًا في موت الخلايا المبرمج والنخر، بالإضافة إلى مسارات الالتهاب اللاحقة لمستقبل TNFR1 ومستقبلات أخرى. يتم فسفرة MLKL عند سيرين 358 بواسطة RIPK3، ويُعتبر مؤشرًا حيويًا لبدء النخر المبرمج المعتمد على RIPK1/RIPK3.
النخر المبرمج هو مسار موت خلوي نخراني مُبرمج، يُعرف أيضًا باسم "الموت الخلوي الالتهابي"، ويرتبط ارتباطًا وثيقًا بأمراض تشمل الأمراض الالتهابية والتنكسية العصبية، بالإضافة إلى السرطان. ولذلك، أصبح MLKL هدفًا دوائيًا هامًا لصناعة الأدوية. وتتمثل الاستراتيجيات العلاجية في تطوير مثبطات كيناز جزيئية صغيرة محددة، مثل Necrostatin-1 وNecrostatin-1s المعروفة.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-MLKL (Ser358)
يقيس اختبار Phospho-MLKL (Ser358) بروتين MLKL عند فسفرته عند الموقع Ser358. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم الاختبار جسمين مضادين، أحدهما موسوم بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول فحص الفوسفو-MLKL (Ser358) ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين MLKL المفسفر (Ser358) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص أحادي اللوحة لـ Phospho-MLKL (Ser358)
يمكن الكشف عن بروتين MLKL المُفسفر (Ser358) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المُصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
متوافق مع أنظمة التشغيل الآلي - نعم
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الالتهاب، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924