Product Description
ملخص
يقيس اختبار Total-MLKL الخلوي إجمالي بروتين MLKL، ويمكن استخدامه كاختبار معايرة مع مجموعة Phospho-MLKL (Ser358). تتوافق هذه المجموعة مع المحاليل المنظمة المستخدمة في مجموعة Phospho-MLKL، لذا يمكن استخدام نفس المستخلص الخلوي لتحليل كلٍ من البروتينات المفسفرة والبروتينات الكلية.
يُعدّ بروتين MLKL (بروتين يشبه نطاق كيناز السلالة المختلطة) وسيطًا رئيسيًا في موت الخلايا المبرمج والنخر، بالإضافة إلى مسارات الالتهاب اللاحقة لمستقبل TNFR1 ومستقبلات أخرى. يتم فسفرة MLKL عند سيرين 358 بواسطة RIPK3، ويُعتبر مؤشرًا حيويًا لبدء النخر المبرمج المعتمد على RIPK1/RIPK3.
النخر المبرمج هو مسار موت خلوي نخراني مُبرمج، يُعرف أيضًا باسم "الموت الخلوي الالتهابي"، ويرتبط ارتباطًا وثيقًا بأمراض تشمل الأمراض الالتهابية والتنكسية العصبية، بالإضافة إلى السرطان. ولذلك، أصبح MLKL هدفًا دوائيًا هامًا لصناعة الأدوية. وتتمثل الاستراتيجيات العلاجية في تطوير مثبطات كيناز جزيئية صغيرة محددة، مثل Necrostatin-1 وNecrostatin-1s المعروفة.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص MLKL الكلي
يقيس اختبار HTRF Total-MLKL مستوى التعبير عن بروتين MLKL في مستخلص خلوي. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Total-MLKL جسمين مضادين موسومين: أحدهما مرتبط بفلوروفور مانح، والآخر بفلوروفور مستقبل. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. في وجود بروتين MLKL في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذين المركبين إلى تقريب الفلوروفور المانح من المستقبل، مما يُولد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول فحص MLKL الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف Total-MLKL HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص MLKL الكلي في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن بروتين MLKL الكلي باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
متوافق مع أنظمة التشغيل الآلي - نعم
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 2، محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الالتهاب، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924