Product Description
ملخص
يُعتبر بروتين كيناز 5' المنشط بواسطة AMP (AMPK) مفتاحًا رئيسيًا لعمليات الأيض. يتم تنشيط AMPK عن طريق الفسفرة على الثريونين 172 بواسطة CaMKK2 وLKB1، من بين عوامل أخرى. عند التنشيط، يثبط AMPK تخليق الأحماض الدهنية والكوليسترول والدهون الثلاثية، وينشط امتصاص الأحماض الدهنية وأكسدة بيتا، بالإضافة إلى تحفيز امتصاص الجلوكوز. يشارك AMPK أيضًا في تنشيط الالتهام الذاتي من خلال الفسفرة المباشرة لـ ULK1. تُمكّن مجموعة Revvity الخلوية المتجانسة HTRF phospho-AMPK (Thr172) من الكشف الكمي عن تعديل بروتين كيناز AMP المنشط، المفسفر عند الثريونين 172.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-AMPK (Thr172)
يقيس اختبار فوسفو-AMPK (Thr172) مستوى AMPK عند فسفرته عند Thr172. وعلى عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار فوسفو-AMPK (Thr172) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة المفسفرة على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المُفسفر في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-AMPK (Thr172
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن فوسفات AMPK (Thr172) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص أحادي اللوحة لـ Phospho-AMPK (Thr172)
يمكن الكشف عن AMPK المُفسفر (Thr172) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المُصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأيض/السكري، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924