Product Description
ملخص
يُتيح هذا الاختبار الخلوي بتقنية HTRF قياس كمية بروتين STING المُفسفر في الفئران عند الموقع Ser365 بدقة وسهولة. بعد الإصابة بالبكتيريا الممرضة وارتباط الحمض النووي المزدوج (dsDNA) بالمستشعر السيتوبلازمي cGAS، يُفسفر بروتين STING بواسطة TBK1. وهذا يُتيح ارتباطه بـ IRF3، الذي يُحفز إنتاج الإنترفيرونات من النوع الأول واستجابات مناعية أخرى. ثم يتم إيقاف مسار STING عن طريق تحلله عبر الالتهام الذاتي.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:
تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-ستينغ (سيرين 365) في الفئران
يقيس اختبار فوسفو-ستينغ (Ser365) في الفأر بروتين ستينغ عند فسفرته عند الموقع Ser365. على عكس اختبار ويسترن بلوت، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار فوسفو-ستينغ (Ser365) في الفأر جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين معقد مناعي يضم الجسمين المضادين الموسومين. يؤدي ذلك إلى تقريب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، مما يُولد إشارة نقل طاقة رنين فلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص الفأر الفوسفوري-ستينغ (Ser365) ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض (إما صفيحة HTRF 384-lv أو صفيحة 96-lv) قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين HTRF Mouse Phospho-STING (Ser365). يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص الفأر الفوسفوري-ستينغ (Ser365) أحادي اللوحة
يمكن الكشف عن بروتين STING المُفسفر (Ser365) في الفئران باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المُصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 4
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
النوع المستهدف - الفأر
تقنية TR-FRET
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924