Product Description
ملخص
يقيس اختبار SHP1 الخلوي الكلي مستوى التعبير عن بروتين SHP1، ويمكن استخدامه كاختبار معايرة مع مجموعة phospho-SHP1 Y564 الخاصة بنا. ولأن هذين الاختبارين، سواءً للكشف عن بروتين SHP1 الكلي أو للكشف عن بروتين SHP1 المفسفر، متوافقان، يمكن استخدام المجموعتين بالتوازي على نفس المستخلصات الخلوية.
تُفرط العديد من الخلايا السرطانية في التعبير عن روابط مثبطات نقاط التفتيش المناعية، مثل PD-L1. يرتبط PD-L1 بمستقبل مثبط نقطة التفتيش المناعية المقابل له، PD1، الموجود على سطح الخلايا اللمفاوية التائية. بدوره، يقوم مُركب PD1-PDL1 بتجنيد وتنشيط عوامل مثبطة فعالة، مثل SHP1 أو SHP2. يُحفز هذان الفوسفاتازان، اللذان يتم فسفرتهما على Tyr564 وTyr542 على التوالي بواسطة كيناز Lck، إزالة الفسفرة من بروتينات الإشارة، مثل ZAP-70 أو SLP-76، المشاركة في مسار تنشيط الخلايا التائية. في النهاية، يُشارك كل من SHP1 وSHP2 المُنشطان في تثبيط الخلايا التائية.
يُعتقد أن منع تنشيط SHP1 و/أو SHP2 بواسطة مثبطات الجزيئات الصغيرة يساهم في استعادة الاستجابة المناعية ضد الأورام.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص SHP1 الكلي
يقيس اختبار SHP1 الكلي مستوى التعبير عن بروتين SHP1 بغض النظر عن حالة فسفرته. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار SHP1 الكلي جسمين مضادين موسومين، أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يتميز كلا الجسمين المضادين بتخصص عالٍ تجاه جزء محدد من البروتين. عند وجود بروتين SHP1 في مستخلص خلوي، يؤدي إضافة هذين المركبين إلى تقريب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، مما يُولد إشارة نقل طاقة رنين فلوري (FRET). تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم التعبير عن البروتين دون الحاجة إلى غسل العينة.
بروتوكول فحص SHP1 الكلي ثنائي الألواح
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين SHP1 الكلي بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص SHP1 الكلي في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن بروتين SHP1 الكلي باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الإجمالي
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: الأمراض المعدية، الأورام، والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924