مجموعة الكشف عن بروتين كيناز MAPK الفوسفوري P38 (Thr180/Tyr182) البشري والفأري Revvity، 64P38PEG، HTRF، 500 نقطة اختبار

ملخص
يُتيح هذا الاختبار الخلوي بتقنية HTRF قياس كمية بروتين p-38-MAPK المُفسفر عند الموقعين Thr180/Tyr182 بدقة وسهولة. تُستخدم هذه المجموعة في أبحاث الالتهابات، والاستجابة المناعية، والأورام. وبفضل بروتوكولها المُبسط، والمناسب للاستخدام بكميات صغيرة، يُمكن استخدام هذه المجموعة في مختلف المجالات، بدءًا من الأبحاث الأساسية وصولًا إلى فحص الأدوية عالي الإنتاجية.
توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:

تنسيق متجانس للإضافة والقراءة
لا توجد خطوات غسيل
خلفية منخفضة
تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً
إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفور-p38 MAPK (Thr180/Tyr182)
يقيس اختبار Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) بروتين p38 MAPK عند فسفرته عند الموضعين Thr180/Tyr182. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) جسمين مضادين موسومين: أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح، والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالوحدة المفسفرة على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدتها بشكل مباشر مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، وتوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتينات في شكل اختبار بدون غسل.

بروتوكول فحص ثنائي الألواح لبروتين كيناز MAPK p38 الفوسفوري (Thr180/Tyr182)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن بروتين MAPK الفوسفوري p38 (Thr180/Tyr182) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.

بروتوكول فحص أحادي اللوحة لبروتين كيناز MAPK p38 الفوسفوري (Thr180/Tyr182)
يمكن الكشف عن بروتين p38 MAPK المُفسفر (Thr180/Tyr182) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجالات العلاجية: أمراض القلب والأوعية الدموية، الأمراض المعدية، التهاب الكبد الدهني غير الكحولي/التليف، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 500 نقطة تحليل