Product Description
ملخص
يُتيح هذا التحليل الخلوي بتقنية HTRF قياس كمية بروتين p62/SQSTM1 المُفسفر عند الموقع Ser403 بدقة وسهولة. يُعدّ p62/SQSTM1 بروتينًا رابطًا لليوبيكويتين، ويشارك في تنظيم الالتهام الذاتي، وهي آلية خلوية تُتيح التخلص من البروتينات أو العضيات غير الطبيعية، وتلعب دورًا في السرطان، والأمراض التنكسية العصبية، بالإضافة إلى أمراض القلب والأوعية الدموية والأمراض المعدية.
يعمل بروتين p62/SQSTM1 كحلقة وصل بين بروتين الحمولة متعدد اليوبيكويتين والجسيمات الذاتية، وذلك من خلال تفاعله المباشر مع كل من بروتين الحمولة وبروتين LC3، الذي يشارك في تكوين الجسيمات الذاتية. وقد رُبط تنشيط p62/SQSTM1 مؤخرًا بفسفرة ULK1 و mTOR على بقايا مختلفة، مثل سيرين 403.
يعزز مسار الالتهام الذاتي المنشط تحلل البروتينات المرتبطة بـ p62 والمُيوبيكويتينية.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص الفوسفور-p62/SQSTM1 (Ser403)
يقيس اختبار Phospho-p62/SQSTM1 (Ser403) من Revvity بروتين p62 عند فسفرته عند الموقع Ser403. وعلى عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم اختبار Phospho-p62 (Ser403) جسمين مضادين موسومين، أحدهما يحمل جزيء فلوري مانح والآخر يحمل جزيء فلوري مستقبل. يُختار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما يُختار الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الجزيء الفلوري المانح من الجزيء المستقبل، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-p62/SQSTM1 (Ser403)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض (إما صفيحة HTRF 384-lv أو صفيحة 96-lv) قبل إضافة كواشف الكشف HTRF Phospho-p62/SQSTM1 (Ser403). يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص أحادي اللوحة لـ Phospho-p62/SQSTM1 (Ser403)
يمكن الكشف عن البروتين p62/SQSTM1 المُفسفر (Ser 403) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المُصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 1، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة: الإنسان والفأر
تقنية TR-FRET
المجالات العلاجية: أمراض القلب والأوعية الدموية، الأمراض المعدية، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924