Product Description
ملخص
يكشف هذا الفحص الخلوي القائم على تقنية HTRF بسهولة ودقة عن فوسفوليباز C غاما 2 المفسفر (PLCgamma 2) عند Tyr1217.
إنزيم PLCγ2 هو فوسفوليباز متخصص في الفوسفاتيديل إينوزيتول، يُنتج رسلًا ثانوية، ويلعب دورًا محوريًا في نقل الإشارات، لا سيما في خلايا الدم مثل الخلايا البائية، والخلايا البدينة، والبلعميات، والخلايا القاتلة الطبيعية، والصفائح الدموية. عند تحفيز مستقبلات مختلفة، مثل مستقبلات مستضدات الخلايا البائية (BCR) ومستقبلات Fc (FcRs)، يتفاعل PLCγ2 مع العديد من البروتينات المُهايئة، ويُفسفر بواسطة كينازات التيروسين داخل الخلايا. تشمل عملية الفسفرة عدة مواقع، أحدها Tyr1217.
تم ربط PLCgamma 2 بالعديد من الأمراض مثل أمراض المناعة الذاتية والالتهابية، ومقاومة الأدوية في السرطان، والتنكس العصبي.
كيف يعمل؟
مبدأ فحص فوسفو-PLCγ2 (Tyr1217)
يقيس اختبار Phospho-PLCg2 (Tyr1217) بروتين PLCg2 عند فسفرته عند الموقع Tyr1217. على عكس اختبار Western Blot، يعتمد هذا الاختبار كليًا على الألواح ولا يتطلب استخدام الهلام الكهربائي أو الفصل الكهربائي أو النقل. يستخدم الاختبار جسمين مضادين، أحدهما موسوم بصبغة فلورية مانحة والآخر بصبغة مستقبلة. تم اختيار الجسم المضاد الأول لقدرته على الارتباط النوعي بالموقع المفسفر على البروتين، بينما تم اختيار الجسم المضاد الثاني لقدرته على التعرف على البروتين بغض النظر عن حالة فسفرته. تُتيح فسفرة البروتين تكوين مُركب مناعي يضم كلا الجسمين المضادين الموسومين، مما يُقرّب الصبغة الفلورية المانحة من الصبغة المستقبلة، وبالتالي يُولّد إشارة FRET. تتناسب شدة هذه الإشارة طرديًا مع تركيز البروتين المفسفر الموجود في العينة، مما يوفر وسيلة لتقييم حالة فسفرة البروتين في اختبار لا يتطلب غسلًا.
بروتوكول فحص ثنائي الألواح لـ Phospho-PLCg2 (Tyr1217)
يتضمن بروتوكول الطبقتين زراعة الخلايا في صفيحة ذات 96 بئراً قبل تحللها، ثم نقل المستخلصات إلى صفيحة كشف ذات حجم منخفض و384 بئراً قبل إضافة كواشف الكشف عن فوسفاتاز البروتين Cα2 (Tyr1217) بتقنية HTRF. يُمكّن هذا البروتوكول من مراقبة حيوية الخلايا وكثافتها.
بروتوكول فحص الفوسفو-PLCg2 (Tyr1217) في لوحة واحدة
يمكن الكشف عن إنزيم PLCγ2 المُفسفر (Tyr1217) باستخدام كواشف HTRF في طبق واحد يُستخدم للزراعة والتحفيز والتحليل. لا حاجة لخطوات غسل. يُمكّن هذا البروتوكول المصمم بتقنية الفحص عالي الإنتاجية (HTS) من تصغير حجم العينة مع الحفاظ على جودة HTRF عالية. التطبيق: إشارات الخلية
براند-HTRF
طريقة الكشف - HTRF
توافق محلول التحلل - محلول التحلل 2، محلول التحلل 3، محلول التحلل 4، محلول التحلل 5
التعديل الجزيئي - الفسفرة
مجموعة المنتجات - طقم
حجم العينة - 16 ميكرولتر
شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف
البروتينات الفوسفورية من الفئة المستهدفة
الأنواع المستهدفة - الإنسان
تقنية TR-FRET
المجال العلاجي: علم الأعصاب والأورام والالتهابات
حجم الوحدة - 10000 نقطة تحليل
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924